Методы лабораторной диагностики гельминтов. Диагностика протозойных инфекций

Отбор проб и их консервирование

Для исследования берут фекалии из разных мест порциями в количестве 50 г и в чистой стеклянной или пластмассовой посуде с плотной крышкой направляют в лабораторию. Исследованию подвергаются свежие фекалии (не более суточной давности), а в некоторых случаях (при исследовании на стронгилоидоз) сразу после дефекации. Предложен ряд консервантов фекалий, содержащих яйца гельминтов: 4-10% раствор формалина, который для предупреждения развития яиц анкилостомид необходимо подогреть до t° 50-60°; смесь 0,2% водного раствора азотнокислого натрия (1900 мл), раствора Люголя (5 г йода, 10 г йодистого калия, 250 мл воды), формалина (300 мл) и глицерина (25 мл), в к-рой яйца гельминтов сохраняются 6-8 мес.; смесь глицерина (5 мл), формалина (5 мл) и воды (100 мл); растворы 1-1,5% детергентов «Лотос», «Экстра», «Барф», «Тайд» и т. д. (в весовом соотношении фекалий и раствора детергента 1: 5); смесь мертиолата 1: 1000 (200 мл), формалина (25 мл), глицерина (5 мл), дистиллированной воды (250 мл) с добавлением 0,6 мл раствора Люголя (из расчета 1 г фекалий на 10 мл смеси).

Для диагностики гельминтозов применяются макро- и микрогельминтоскопические методы исследования фекалий.

Макрогельминтоскопические исследования

Метод отстаивания

Суточную порцию фекалий тщательно перемешивают с 5-10-кратным количеством воды, сливают в высокие стеклянные цилиндры (банки, ведра) и оставляют до полного осаждения взвешенных частиц. Верхний мутный слой осторожно сливают и доливают чистую воду доверху (повторяют несколько раз, пока вода над осадком не станет прозрачной). Слив верхний слой, переносят осадок в кювету или чашку Петри и просматривают его (на темном фоне) под лупой или невооруженным глазом.

Метод отсеивания

Перемешанные с водой фекалии помещают на верхнее сито прибора, состоящего из системы сит с отверстиями убывающего диаметра, прибор соединяют с водопроводной сетью и, открыв водопроводный кран, промывают, а вытекающую жидкость отводят в канализацию. Крупные гельминты остаются на верхнем сите, а более мелкие задерживаются на нижних. Сита переворачивают и, смыв содержимое в темные кюветы, просматривают невооруженным глазом или под лупой.

Микрогельминтоскопические исследования

Проводят с целью обнаружения яиц (гельминтоовоскопические методы - цветн. рис. 1) или личинок гельминтов (гельминтоларвоскопические методы).

Гельминтоовоскопические методы

Качественные методы без обогащения

Нативный мазок . Небольшое количество фекалий растирают на предметном стекле в капле 50% раствора глицерина или кипяченой воды. Крупные частицы осторожно удаляют, смесь покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом (просматривают два мазка). Удобнее и проще готовить длинные мазки между двумя предметными стеклами. Нативный мазок применяют только в дополнение к методам обогащения, т. к. он недостаточно эффективен, особенно при слабых инвазиях.

Толстый мазок с целлофаном по Като (К. Kato, 1954) является весьма эффективным методом исследования. Кусочки гидрофильного целлофана (размером 4x2 см) замачивают на 24 часа в смеси глицерина (50 мл), 6% раствора фенола (500 мл) и 3% водного раствора (6 мл) зеленой малахитовой (последняя не обязательна). Ок. 100 мг фекалий размазывают на предметном стекле и, покрыв кусочком влажного целлофана, придавливают резиновой пробкой № 5. Препарат исследуют через 30-60 мин., когда он слегка подсохнет и просветлится, вследствие чего яйца гельминтов легко обнаружить под малым увеличением микроскопа.

Качественные методы с обогащением (методы всплывания и осаждения)

Первые основаны на применении насыщенных растворов различных хим. веществ, в которых яйца всплывают благодаря разнице удельного веса.

Метод Кофоида-Барбера (Ch.А. Kofoid, М. A. Barber) в модификации Фюллеборна (F. Fulleborn, 1920). Ок. 5 г фекалий в высокой и узкой баночке (объемом 100 мл) размешивают деревянной палочкой в 100 мл насыщенного раствора поваренной соли, уд. вес к-рого 1,18 (400 г соли растворяют при кипячении в 1 л воды). Всплывшие на поверхность крупные частицы быстро удаляют палочкой или кусочком бумаги. После отстаивания смеси в течение 45-90 мин. проволочной петлей (диам. 0,8-1 см) снимают всю поверхностную пленку, переносят ее на предметное стекло. При исследовании на яйца анкилостомид смесь отстаивают 10-15 мин. Можно снимать пленку непосредственно предметным стеклом, к-рым покрывают баночку так, чтобы оно соприкасалось с жидкостью (насыщенный раствор соли доливают до краев баночки). После отстаивания предметное стекло снимают, быстро переворачивают и исследуют под микроскопом (без покровного стекла) приставшую к нему пленку с яйцами гельминтов. Этот метод хорошо выявляет яйца всех нематод и карликового цепня. Тяжелые яйца трематод; большинства цестод и неоплодотворенных аскарид всплывают плохо, поэтому исследуют и осадок. Для этого после снятия пленки жидкость из баночки быстро сливают и из осадка петлей или пипеткой берут несколько капель, переносят их на предметное стекло, добавляют каплю глицерина для просветления и исследуют под микроскопом.

Метод Е. В. Калантарян (1938) Является более эффективной модификацией метода Фюллеборна. В нем раствор поваренной соли заменен насыщенным раствором азотнокислого натрия, уд. вес к-рого 1,39 (один объем азотнокислого натрия растворяют в равном объеме воды при кипячении), пленку снимают через 20-30 мин.

Применяются также методы Фауста (Е. С. Faust, 1939), Брудастова с соавт. (1970) и др.

Для осаждения яиц гельминтов используют хим. вещества, растворяющие жиры и белки фекалий.

Метод Телеманна (W. Telemann, 1908) в модификации Миягавы (Y. Miyagawa, 1913) . Ок. 5 г фекалий растирают в ступке или баночке, добавив по 5 мл этилового эфира и 50% раствора соляной к-ты; смесь процеживают через проволочное или волосяное сито в пробирку и центрифугируют. В пробирке образуется 3 слоя: вверху - эфир с растворенным жиром, ниже - соляная к-та с растворенными белковыми веществами, в осадке - нерастворимые части фекалий и яйца гельминтов. Верхние слои сливают, а к осадку добавляют воду и центрифугируют. Несколько капель осадка переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Этим методом можно обнаружить яйца всех видов гельминтов, но они иногда деформируются.

Метод Ритчи (L. S. Kitchie, 1948). Для растворения жиров и белков используют формалин и эфир.

Для осаждения яиц гельминтов можно применять различные детергенты. За рубежом получил распространение метод фильтрации в специальных аппаратах Белла, который применяется для исследований не только фекалий, но и мочи, крови и т. д.

Существует ряд методов, сочетающих принципы флотации и осаждения яиц. К их числу относятся методы Лейна (С. A. Lane), Риваса (D. Rivas), Горкиной, Дарлинга (S. Т. Darling). Один из таких флотационно-седиментационных методов, а также метод последовательных сливов предложены Н. В. Демидовым (1963, 1965) для исследования на фасциолез и дикроцелиоз.

Количественные методы

Метод Столла (N. R. Stoll, 1926). В градуированную широкую пробирку или колбочку (с двумя метками: 56 и 60 мл) наливают до первой метки децинормальный раствор едкого натра, добавляют фекалии до тех пор, пока уровень жидкости не достигнет второй метки, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и, поместив 10 стеклянных бусинок или мелких камешков, закрывают пробкой и встряхивают в течение 1 мин. Быстро, чтобы взвесь не отстоялась, набирают градуированной пипеткой 0,075 мл смеси (0,005 г фекалий), переносят на предметное стекло с нанесенной на нем сеткой, покрывают покровным стеклом и подсчитывают под микроскопом яйца гельминтов в препарате; умножив полученное число на 200, получают количество яиц в 1 г фекалий. Для более точного результата подсчитывают яйца в двух или более препаратах и берут средний показатель. Метод Столла нечувствителен при слабых инвазиях. Поэтому рекомендуют подсчитывать число яиц в препаратах, приготовленных различными методами флотации или осаждения, при условии постоянного использования равной навески фекалий и посуды одного объема. Используют также толстый мазок по Като.

Метод Бивера (Р. С. Beaver, 1950). Готовят стандартный мазок, густоту к-рого определяют при помощи электрофотометра, а затем подсчитывают в нем все яйца гельминтов.

Гельминтоларвоскопические методы

Метод Берманна (G. Baermann, 1917). 5-10 г свежевыделенных фекалий помещают на металлической сетке в стеклянную воронку, на узком конце к-рой надета резиновая трубка с зажимом. Во избежание загрязнения осадка частицами кала рекомендуется подкладывать (на сетку) бумагу или добавлять в фекалии животный уголь или кукурузную муку. Воронку наполняют теплой водой (t° 45-50°) до соприкосновения с фекалиями. В силу термотропности личинки активно перемещаются в теплую воду и постепенно скапливаются в нижней части воронки, над зажимом. Через 3-4 часа зажим открывают, жидкость спускают в 1-2 пробирки, центрифугируют в течение 2-3 мин., верхний слой сливают, а осадок исследуют на предметном стекле под микроскопом.

Метод выявления мирацидиев шистосом. Фекалии промывают в темноте при t° 8-10°, осадок выдерживают 45 мин. на ярком свете при t° 28°, затем переливают в темную колбу с трубочкой сбоку. Мирацидии концентрируются в прозрачной боковой трубке, откуда их можно выбрать.

Для выявления личинок анкилостом применяют также методы Фюллеборна и др.

Методы исследования других выделений, а также тканей и органов

Ок. 100 мл исследуемой мочи отстаивают 30 мин. в цилиндре и, удалив верхний слой, сливают 10- 15 мл осадка в пробирку, центрифугируют при 1500 об I мин в течение 1-2 мин.; осадок исследуют. Желательно собирать всю суточную порцию мочи.

Моче-половой шистосоматоз диагностируют путем выявления мирацидиев. Порцию свежей мочи центрифугируют в течение 5 мин., осадок переливают в окрашенную в черный цвет колбу, к верхней части к-рой припаяна прозрачная стеклянная трубочка. Добавляют воду в соотношении 1:5, 1: 10 и ставят на 2 часа в термостат при t° 25-30°. Вышедшие из яиц мирацидии видны через прозрачную трубочку невооруженным глазом в виде быстро движущихся точек. При хрон, форме шистосоматоза у больных к концу мочеиспускания выделяется кровь, но яйца в моче находят редко, поэтому рекомендуется прибегать к биопсии мочевого пузыря.

Исследование мокроты. В мокроте могут находиться яйца парагонимусов, шистосом, томинксов, личинки мигрирующих нематод, фрагменты эхинококкового пузыря. Всю доставленную порцию мокроты тщательно просматривают невооруженным глазом или под лупой, выбирают и исследуют все видимые обрывки тканей, скопления ржавого цвета и пр.; затем просматривают всю порцию мазками. Гнойную мокроту заливают равным количеством 0,5% раствора едкой щелочи, центрифугируют и исследуют осадок.

При некоторых гельминтозах в мокроте наблюдаются характерные изменения. При парагонимозе, напр., в мокроте можно обнаружить скопления яиц в виде желтоватых комочков, а также большое количество слизи, лейкоциты, эритроциты, альвеолярные клетки, спирали Куршманна, эластические волокна, кристаллы Шарко-Лейдена. Выявлены также характерные ромбовидные кристаллы с заостренными концами. Наличие большого числа эозинофилов позволяет дифференцировать парагонимоз от туберкулеза.

Исследование содержимого абсцессов и пунктатов . В гнойных выделениях абсцессов, а также в опухолях и кистах, удаленных при оперативном вмешательстве, можно обнаружить гельминтов, их фрагменты, личинки и яйца (эхинококк, альвеококк, спарганум, цистицерк, дирофилярия, аскариды, токсокара, парагонимус и др.). Техника исследования обычная; в некоторых случаях из тканей опухоли готовят гистологические срезы. Гнойное содержимое можно обработать методом Телеманна; прозрачную жидкость исследуют также, как и дуоденальное содержимое, добавляя серный эфир. Эхинококковую жидкость центрифугируют и исследуют осадок на наличие сколексов и крючьев; препараты окрашивают карболфуксином по Цилю-Нельсену.

Исследование крови. В крови обнаруживают микрофилярий и личинок мигрирующих нематод. Каплю крови берут из пальца или из мочки уха и исследуют в свежем виде или готовят из нее препараты.

Каплю крови помещают на предметное стекло с нанесенным квадратом из вазелина и слегка прижимают покровным стеклом. Под микроскопом видны микрофилярии, двигающиеся между клетками крови. Кровь можно помещать между двумя слоями клейкой целлюлозной ленты; микрофилярии сохраняют подвижность в течение 6 час.; в полностью высохшем препарате их можно различить под микроскопом в течение 30 дней. Идентифицировать виды микрофилярий можно лишь в окрашенных мазках или толстых каплях. Приготовленные препараты высушивают, гемолизируют и окрашивают по Романовскому - Гимзе, Райту, Цилю-Нельсену, Лейшману, Папаниколау (см. Райта метод окраски, Романовского-Гимзы метод, Циля-Нельсена метод). Обнаружив микрофилярий в капле крови, окрашенной по Романовскому-Гимзе, препарат дополнительно окрашивают гематоксилином Хансена; через 15-60 мин. промывают 2 мин. в проточной воде. Перекрашенный препарат дифференцируют в 0,2% растворе соляной к-ты; чехлик микрофилярий окрашивается в бледнофиолетовый цвет, а ядерная субстанция тела - в темно-фиолетовый.

При слабых инвазиях необходимо исследовать 2-10 лед крови с анти-коагулянтом (напр., с 5% раствором лимоннокислого натрия) одним из следующих методов.

Метод Кнотта (J. Knott, 1939), модифицированный Маркеллом и Фоге (Е. К. Markell, М. Voge, 1965). 2 мл крови перемешивают в центрифужной пробирке с 10 дел 1% уксусной к-ты, центрифугируют в течение 2 мин. при 1500 об/мин; поверхностный слой сливают, осадок распределяют на нескольких предметных стеклах и исследуют под микроскопом. Препараты можно окрашивать по Романовскому-Гимзе или другими методами.

Метод фильтрации Белла (D. R. Bell, 1967). В аппарате, состоящем из воронки из нержавеющей стали с прямоугольным отверстием и мембранных фильтров той же формы, размером 19 х 42 мм, с величиной пор от 0,8 до 5 мкм, фильтруют в пробирки кровь, гемолизированную в смеси из 1 мл детергента типола и 9 мл физиол, раствора (для ускорения фильтрации аппарат соединен с вакуумным насосом). Фильтр фиксируют в кипящей дистиллированной воде и окрашивают по Романовскому-Гимзе или горячим гематоксилином Эрлиха. Окрашенный фильтр высушивают в эксикаторе или в изопропиловом спирте (последовательно в 3 чашках), просветляют на стекле иммерсионным маслом и исследуют под покровным стеклом. Окрашенные препараты сохраняются несколько недель. Метод Белла наиболее эффективен для количественного учета микрофилярий в крови.

Применяется также метод с поливидоном Голдсмида.

Исследование кожи. В коже можно обнаружить микрофилярий онхо-церков и личинок гельминтов животных, вызывающих кожную форму larva migrans (см.). Срезы кожи или материал, полученный скарификацией, берут в области бедра, икры, ягодицы или на уровне дельтовидной мышцы. Конусообразный кусочек эпидермиса поднимают энтомологической булавкой и, срезав бритвой, исследуют на стекле в капле физиол, раствора. При отрицательном результате свежий препарат повторно просматривают через 10 мин.; личинки обычно локализуются по краям препарата. Полученный материал можно выдерживать в 2 мл физиол, раствора в течение 1-2 час. и исследовать осадок. Рекомендуют брать у больного 5 срезов кожи.

Можно готовить препараты и из крови и тканевой жидкости, выделившихся после сильного сжатия срезов. Капли окрашивают по Майеру, Романовскому-Гимзе или гематоксилином Делафильда.

Стандартный метод количественного учета инвазии. Биопсированный участок кожи диам. 3-5 мм и весом не менее 1-4 мг взвесить, разрезать на мелкие кусочки и подсчитать личинки под микроскопом в физиол. растворе на предметном стекле; 1-4 личинки в поле зрения обозначают знаком +, 5-9 личинок - знаком ++ , 10-19 - знаком +++, 20 и более - знаком + + + +. Количественный учет удобнее проводить на окрашенных препаратах.

Исследование на трихинеллез, цистицеркоз и Шистосоматозы

Выявление личинок трихинелл

Компрессионный метод. Кусочек двуглавой или икроножной мышцы (вблизи сухожилия), взятой хирургическим путем с соблюдением асептики, расщепляют препаровальными иглами на отдельные тонкие волоконца, сдавливают их между двумя предметными стеклами в капле глицерина так, чтобы препарат был тонким и прозрачным. Под микроскопом с затемненным полем зрения хорошо видны личинки трихинелл. Эффективно исследование нескольких кусочков мышц в компрессориумах, используемых в вет.-сан. практике, особенно в специальных трихинеллоскопах.

Метод переваривания Бечмена (G. W. Bachman, 1928). 1 а измельченных мышц заливают 60 мл искусственного желудочного сока (0,5 г пепсина; 0,7 мл концентрированной соляной к-ты; 100 мл воды) и выдерживают 18 час. в термостате при t° 37°; верхний слой жидкости сливают, к осадку добавляют теплой воды (t° 37-45°) и выливают в аппарат Берманна. Через час жид-, кость спускают в пробирку, центрифугируют и исследуют осадок. Если личинки заключены в обызвествленные капсулы, их предварительно декальцинируют в растворе соляной, азотной, или серной к-ты.

Биопроба . Кусочки исследуемых мышц скармливают белым мышам или крысам. Через 2-3 дня можно обнаружить половозрелых трихинелл в дуоденальном содержимом, а через 2-3 нед.- личинок в мышцах диафрагмы и языка.

Гистологические срезы. Кусочки мышц фиксируют в жидкости Буэна, Ценкера или др.; обычным способом готовят срезы на микротоме и окрашивают их гематоксилином Делафильда.

Выявление цистицерков

Кусочек экстирпированной мышцы, соединительной ткани и пр. осматривают невооруженным глазом, осторожно выделяют цистицерк - беловатый полупрозрачный пузырек размером 1-2 см, раздавливают его между двумя предметными стеклами в капле глицерина и исследуют под микроскопом. Для определения жизнеспособности выделенных из тканей цистицерков их выдерживают в 50% растворе желчи на физиол. растворе в термостате при t° 37°; через 10-60 мин. головка жизнеспособного цистицерка выворачивается наружу. Обызвествленных цистицерков предварительно декальцинируют 4% раствором азотной к-ты в течение часа.

Выявление яиц шистосом

При хрон, формах шистосоматозов, когда образование гранулем препятствует выходу яиц из тканей в просвет кишечника или в мочевыводящие пути, применяют биопсию слизистой оболочки прямой кишки, к-рую производят специальной ложкой при помощи ректоскопа, выбирая участок с видимым поражением. Биопсированный кусочек раздавливают между двумя предметными стеклами и исследуют под микроскопом. При отрицательном результате кусочки просветляют в 4% растворе едкой щелочи и готовят из них гистол. срезы. Биопсию слизистой оболочки тощей кишки производят перорально и полученный материал исследуют комперссионным методом или готовят из него гистол, срезы. В ряде случаев моче-полового шистосоматоза диагноз может быть поставлен только на основании эндовезикальной биопсии. При гепатолиенальной форме шистосоматоза производят пункционную биопсию печени; из полученного материала готовят гистол, срезы и исследуют их под люминесцентным микроскопом. Люминесцентный микроскоп с темным полем использования и для исследования тканей печени на яйца шистосом. При поражении шистосомами женских половых путей выделения собирают при помощи влагалищного зеркала или берут острой ложечкой кусочки слизистой оболочки шейки матки; полученный материал исследуют под микроскопом на стекле в капле физиол, раствора.

Исследование на энтеробиоз и тениидозы

Перианальный соскоб (рекомендуется брать вечером, через 1 - 1,5 часа после того, как пациент лег спать, или утром до совершения туалета). Спичкой, срезанной наискось и смоченной в капле жидкости (физиол, раствор, кипяченая вода или 2% раствор двууглекислой соды), нанесенной на предметное стекло, осторожно делаю? соскоб со слизистой оболочки ануса и складок вокруг него (от центра кнаружи). Собранную на конце спички слизь счищают краем покровного стекла в каплю жидкости на предметном стекле и, покрыв этим же покровным стеклом, исследуют. При массовых обследованиях, когда соскобы берут в детских или других учреждениях, использованную спичку помещают в каплю жидкости на предметном стекле, после подсыхания капли покрывают другим предметным стеклом и доставляют в лабораторию, завернув в бумагу и закрепив резинкой. Для исследования ректальной слизи пользуются специальным прибором - трубочкой Шахматова или Циманна, с помощью которых берут слизь из прямой кишки и исследуют мазки под микроскопом.

Метод с ватным тампоном. Пациентам на дом выдают пробирку с ватным тампоном на стеклянной или деревянной палочке; утром пациент протирает перианальные складки тампоном, Смоченным кипяченой водой, и помещает его в пробирку с небольшим количеством воды. В лаборатории тампоны прополаскивают в той же пробирке с новой порцией воды и осадок исследуют после центрифугирования.

Целлофановый метод Холла (М. С. Hall, 1937). Квадратный кусочек целлофана укрепляют резинкой на стеклянной палочке. Соскоб делают сухим целлофаном и помещают его в пробирку. В лаборатории целлофан слегка сдвигают с палочки и, срезав его кончик ножницами, расправляют на предметном стекле; смочив децинормальным раствором едкого натра, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом.

Метод с целлюлозной лентой Грэма (С. F. Graham, 1941). Полоску целлюлозной ленты прижимают клейкой стороной к перианаль-ным складкам обследуемого, затем той же стороной к предметному стеклу и исследуют без покровного стекла; можно добавлять каплю толуена. В. В. Каледин (1972) для этих целей предложил применять целлулоидные диски, вырезанные из отмытой рентгеновской пленки и смоченные глицерином; диски исследуют на предметном стекле в капле силикатного клея. Методом с целлюлозной лентой можно исследовать также нательное белье детей.

Подногтевой соскоб. Края ногтя, ногтевое ложе, подногтевые пространства смачивают 0,5-1% раствором едкой щелочи и протирают влажными ватными тампончиками. Тампоны помещают в центрифужные пробирки с этим же раствором, центрифугируют и исследуют осадок.

Методы исследования объектов окружающей среды на яйца и личинки гельминтов (санитарно-гельминтологические исследования)

Исследования проводят с целью определения степени загрязненности яйцами и личинками гельминтов объектов внешней среды. Полученные данные используют для оценки сан. состояния учреждений и предприятий и эффективности проводимых мероприятий по борьбе с гельминтозами.

При изучении степени загрязненности различных объектов окружающей среды яйцами и личинками гельминтов и оценки их роли в эпидемиологии гельминтозов важно установить не только число найденных яиц, но и их жизнеспособность и инвазионность, которые определяют: а) по внешнему виду, под микроскопом; б) окрашиванием различными красителями, в т. ч. люминесцентными; как правило, живые яйца и личинки не окрашиваются; в) культивированием в оптимальных условиях до инвазионной стадии; г) заражением лабораторных животных (биопроба).

Исследования воды и канализационных стоков. Для одного исследования используют 10-25 л воды (рек, морей, прудов, купальных бассейнов, водопровода) и 1-2-5 л канализационных стоков.

Метод 3. Г. Васильковой (1941). Воду или канализационные стоки фильтруют через мембранные ультрафильтры в аппарате Гольдмана, состоящем из стеклянной или металлической воронки с фильтрами, соединенной при помощи кольца-насадки с колбой Бунзена. Для ускорения процесса фильтрации к аппарату подключают вакуумный насос. После фильтрации мембранные фильтры просматривают под микроскопом, просветлив их 50% раствором глицерина; скопившийся осадок счищают и просматривают отдельно в виде мазков. Применяются фильтровальные аппараты и других конструкций.

Метод Г. Ш. Гуджабидзе и Г. А. Юдина (1963) для исследования канализационной жидкости. 1 л жидкости отстаивают 2 часа в цилиндре Лисенко; полученный осадок (5-9 мл) обрабатывают, как при исследовании почвы (см. ниже).

Метод Н. А. Романенко (1967). К 1л сточной жидкости, помещенной в стеклянный цилиндр емкостью 1200-1500 мл, добавляют 0,4-0,6 г сернокислого алюминия или хлорного железа (с целью коагулирования, ускоряющего процесс осаждения взвешенных частиц) и через 40 мин. смесь центрифугируют 3 мин. при 1000 об/мин; верхний слой сливают, а для растворения хлопьев добавляют 1-2 мл 3% раствора соляной к-ты, затем 150 мл насыщенного раствора азотнокислого натрия. Осадок исследуют, как почву.

Исследование почвы

Загрязненность почвы яйцами гельминтов определяют с целью выявления очагов гельминтозов и оценки эффективности работы по их оздоровлению.

Метод 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер (1948). 12,5 г почвы смешивают в пробирках (объемом 100 мл) из нержавеющей стали или латуни с 20 мл 5% раствора едкой щелочи, добавив 10 стеклянных бусинок или мелких камешков. Пробирки закрывают резиновыми пробками и встряхивают в течение 20 мин. в аппарате для встряхивания или вручную. Вынув пробки, пробирки центрифугируют 3-5 мин., поверхностную жидкость сливают, к осадку добавляют 60-80 мл насыщенного раствора азотнокислого натрия и, тщательно перемешав, вновь центрифугируют 3-5 мин. В сю поверхностную пленку со всплывшими яйцами снимают, прикасаясь к поверхности смеси сложной петлей (5-6 петель, соединенных на общем стержне), и переносят в стаканчик с водой; перемешивают с тем же раствором, центрифугируют; всю процедуру повторяют не менее 3 раз. Содержимое стаканчика, куда переносят пленку, разбавляют водой и фильтруют через мембранные фильтры, которые исследуют под микроскопом в капле глицерина.

Метод 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер в модификации А. А. Намитокова (1961) отличается от основного метода тем, что вместо исследования препаратов пленки используют половину содержимого пробирки (каждый раз добавляя новую порцию насыщенного раствора азотнокислого натрия), фильтруют и исследуют фильтры.

Н. А. Романенко (1968) рекомендует исследовать на яйца гельминтов пробы почвы и осадка сточных вод с помощью аппарата, предложенного Г. Ш. Гуджабидзе. 50 г почвы тщательно перемешивают в течение 1 мин. в 150 мл воды в центрифужных пробирках (емкостью 250 мл) специальными лопастями, которые приводятся в действие электромотором. Смесь центрифугируют 3 мин. при 1000 об/мин, воду сливают и, добавив 150 мл насыщенного раствора азотнокислого натрия, перемешивают и снова центрифугируют 3 мин. Пробирки с пробами устанавливают в штатив, доливают раствор азотнокислого натрия до образования выпуклого мениска, покрывают предметными стеклами (10 х 6 см) и отстаивают 10-15 мин., затем стекла снимают и исследуют; процедуру повторяют не менее 4 раз.

Исследование на личинки гельминтов по методу Берманна (1917). 200-400 г почвы помещают в кусочке марли на металлическую сетку (с диам, отверстий 1-2 мм), надетую на широкую часть стеклянной воронки, укрепленной в штативе. На узкий конец воронки натянута резиновая трубка с зажимом. Воронку наполняют теплой (t° 50°) водой так, чтобы нижняя часть сетки с почвой соприкасалась с водой. В силу термотропности личинки активно выползают в теплую воду и, оседая, скапливаются в нижней части резиновой трубки над зажимом. Через 3-4 часа из воронки выпускают в пробирку 50 мл содержимого, центрифугируют и исследуют осадок.

Исследование овощей, фруктов и ягод

Исследуют преимущественно овощи, ягоды и фрукты, употребляемые в пищу без термической обработки. Метод 3. Г. Васильковой (1948). По 5-10 штук овощей или фруктов (ок. 0,5 кг) или 100- 200 г зелени (салат, зеленый лук) заливают на несколько часов водой в широкогорлых стеклянных банках с притертыми пробками и встряхивают 10-20 мин. в аппарате для встряхивания или вручную. Воду сливают, исследуемые объекты прополаскивают чистой водой и всю смывную воду фильтруют в аппарате Гольдмана; фильтры исследуют, просветлив глицерином. Можно подкрашивать фильтры 25% раствором Люголя в глицерине; при этом яйца гельминтов окрашиваются в коричневый цвет и их легко распознать среди крахмальных зерен, окрашенных в синий цвет. Большой осадок обрабатывают, как почву.

Исследование смывов с предметов обихода и с рук. Кисточкой для клея (или ватным тампоном, обернутым кусочком капроновой ткани), смоченной в 2% растворе двууглекислой соды, многократно проводят по обследуемому предмету или рукам, после чего ополаскивают в том же растворе, налитом в пробирку. В лаборатории кисточки и тампоны прополаскивают чистой водой; все смывные воды центрифугируют и исследуют осадок.

Метод В. А. Гефтер (1960). Пыль с мягкого инвентаря эффективнее собирать при помощи пылесоса, подключенного к воронке, к-рая состоит из 2 разъемных частей: на поверхность нижней части, покрытой металлической или пластмассовой сеткой, помещают мембранный фильтр и укрепляют его, надев верхнюю часть воронки. Собранную воронку присоединяют к шлангу пылесоса резиновой трубкой. Пыль с предмета собирают в течение 3 мин., после чего фильтр вынимают и заменяют новым. В лаборатории фильтры просматривают под микроскопом, просветлив их глицерином. Если слой пыли на фильтре велик, его соскабливают и просматривают в виде мазков или обрабатывают, как почву.

Иммунологические методы диагностики

Возможность использования иммунол. методов для диагностики гельминтозов обусловлена способностью гельминтов продуцировать активные антигены, воздействующие на иммунокомпетентные клетки хозяина и стимулирующие продукцию антител. Наиболее эффективны иммунодиагностические методы при кишечных гельминтозах, когда секреты и экскреты гельминтов, обладающие антигенной активностью, попадают непосредственно в кровь хозяина. Иммунол, реакции используют для диагностики аскаридоза, трихинеллеза, филяриатозов, шистосоматозов, эхинококкоза и альвеококкоза, цистицеркоза, парагонимоза, симптомокомплекса larva migrans- (токсокароз, ангиостронгилез) и др. Применяют различные серол, тесты (реакции преципитации, агглютинации, связывания комплемента, флюоресцирующих антител) и внутрикожные аллергические пробы. Антигены готовят из личинок и половозрелых гельминтов, используя солевые экстракты гомогенатов свежезамороженных или лиофилизированных тканей, а также разные биологически активные жидкости (жидкость из эхинококковых пузырей, полостную жидкость аскарид и др.). В связи с тем что гельминты обладают весьма сложной антигенной структурой и в их антигенной мозаике имеются компоненты и отдельные детерминанты, перекрестно реагирующие с другими видами гельминтов, бактериями, антигенами хозяина, разрабатываются методы очистки их от неспецифических компонентов. Фракционирование проводят разными методами: гель-фильтрацией в колонках с сефадексами, ионообменной хроматографией на ДЕАЕ-сефадексе, обработкой кислотами и др. Фракционные антигены обладают обычно более высокой специфичностью, чем цельные экстракты, активность же их приблизительно одинакова. Иммунодиагностические методы находят все большее применение. Реакции используют не только для наиболее полного и раннего выявления больных, но и для исследования очагов и изучения эпидемиологии гельминтозов.

Серологические реакции. Реакцию микропреципитации на живых личинках применяют для диагностики нематодозов - преимагинальной фазы аскаридоза, анкилостомидозов, трихинеллеза. Реакция становится положительной через 5- 10 дней после заражения (аскаридозом, анкилостомидозами) и сохраняется в течение 90-100 дней. Антигеном служат живые личинки нематод, выделенные из тканей экспериментально зараженных лабораторных животных. Выделенных личинок тщательно отмывают от белков хозяина стерильным физиол, раствором и дистиллированной водой и по 10-15 экз. помещают с помощью пастеровской пипетки на стерильное предметное стекло с луночкой. Наносят 2-3 капли испытуемой сыворотки, накрывают стерильным покровным стеклом, заключают во влажную камеру (чашка Петри, выстланная увлажненной фильтровальной бумагой) и выдерживают 24-48 час. в термостате при t° 37°. При положительной реакции под малым увеличением микроскопа видны вокруг ротового и анального отверстий личинок серовато-белые, слегка опалесцирующие массы преципитатов шаровидной или зигзагообразной формы. Эффективность реакции достигает 85-95% .

Реакция кольцепреципитации разработана В. П. Пашуком (1957) для диагностики трихинеллеза. Реакция становится положительной на 2--3-й неделе болезни. Эффективность ее достигает 80-90% . Антигеном служит экстракт порошка из высушенных при t° 35° личинок, выделенных из мышц зараженных животных. В пробирки диам. 0,5 см наливают по 0,1 мл каждого разведения антигена и осторожно наслаивают на него (или опускают на дно) равное количество испытуемой сыворотки так, чтобы жидкости не смешивались. Пробирки выдерживают 30 мин. в термостате при t° 37°, а затем 30- 60 мин. при комнатной температуре. При положительной реакции на границе соприкосновения антигена и сыворотки появляется беловатое нежное кольцо, легко распадающееся при встряхивании.

Реакция преципитации в геле по Оухтерлоню (О. Ouchterlony, 1949) в микромодификации А. И. Гусева и В. С. Цветкова предложена И. А. Гиновкер, Е. А. Забозлаевой, А. В. Дорониным (1970) для диагностики ранней фазы описторхоза. По предварительным данным, ее эффективность 87%. Антигеном служит экстракт гомогената свежезамороженных половозрелых описторхисов, выделенных из печени кошек.

Реакция непрямой гемагглютинации (см.) с диагностикумом - взвесью формалинизированных и танизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных эхинококковой жидкостью,- разработана

Л. Н. Степанковской (1972) для диагностики эхинококкоза и альвеококкоза.

РНГА с диагностикумом из формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных экстрактом гомогената свежезамороженных цистицерков свиного цепня, предложена Л. М. Коноваловой (1973) для диагностики цистицеркоза мозга; она эффективна в 85% случаев.

РНГА с аскаридным диагностикумом предложена для диагностики преимагинальной фазы аскаридоза.

Реакция связывания комплемента (см.) ставится по обычной методике и используется для диагностики трихинеллеза и цистицеркоза.

Метод люминесцирующих антител (непрямой метод). Этот метод с обезжиренным сухим гомогенатом цистицерков свиного цепня в качестве антигена, фиксированным на предметном стекле, разработан JI. М. Коноваловой (1973) для диагностики цистицеркоза человека. Та же реакция с гистол, срезами личинок трихинелл в качестве антигена разработана для диагностики трихинеллеза.

E. С. Лейкина, В. А. Гефтер.

Гельминтозы человека - одна из самых распространенных групп заболеваний среди населения земного шара. При любом подозрении на заражение гельминтами необходимо сдать анализ на яйца глист. От правильности сбора материала зависит достоверность результатов, поэту важно знать особенности сдачи анализа.

Что обнаруживает анализ

Анализ кала на яйца глистов показывает заражение следующими гельминтами:

Вместе с анализом кала на яйцеглист часто назначается микроскопирование фекалий на цисты и вегетативные формы простейших микроорганизмов.

Это исследование проводится из того же материала. Оно позволяет выявить наличие цист и взрослых форм простейших в нижних отделах желудочно-кишечного тракта.

Когда требуется обследование

Направление на анализ кала на яйца глист дается при следующих обстоятельствах:

Сколько действует справка на яйцеглист? Результат исследования действителен 10 дней.

Как сдавать анализ правильно

От правильности сбора материала для исследования зависит достоверность результата и постановка правильного диагноза.

Какой-либо специфической подготовки не требуется. Достаточно перед тем, как сдать анализ соблюдать некоторые простые правила:

Кал нужно собрать в сухую, чистую, плотно закрывающуюся емкость. Специальные баночки под анализы можно приобрести в любой аптеке.
Перед актом дефекации нельзя мочиться, чтобы моча не попала в кал.
Собрать материал для исследования надо из разных частей каловых масс.
Перед забором кала нужно исключить прием слабительных средств, любых препаратов, влияющих на перистальтику кишечника, а также веществ, способных менять окраску фекалий. Нельзя применять лекарственные средства местного действия (свечи, крема, мази).
Женщинам нельзя сдавать анализ вовремя менструации.
Объем материала должен составлять 1-2 чайных ложки.

Хранить собранный анализ не рекомендуется. Лучше отнести его в лабораторию через 30-40 минут после сбора. Если это невозможно, то нужно поместить материал в холодильник при температуре 5-8 градусов. Хранить не более 8 часов. Чем больше пройдет времени от сдачи материала до доставки его на анализ, тем ниже его достоверность.

Нельзя забывать подписывать контейнеры с материалами на анализ. Приобрести тару можно в любой аптеке, или ее выдадут в лаборатории.

Правила забора материала на анализ для выявления цист и вегетативных форм простейших ничем не отличаются от приведенных выше.

Анализ на энтеробиоз

Из-за особенностей жизненного цикла остриц для диагностики энтеробиоза обычного анализа кала на яйца глистов бывает недостаточно. Тогда делают перианальный соскоб.

Соскоб - это метод обследования, когда материал для изучения получают из области анального отверстия.

Метод Грэхема. Суть - забор материала с помощью ленты с липким слоем. Она наклеивается в области ануса, через несколько секунд снимается. Яйца гельминта приклеиваются на ленту.
Соскоб по Рабиновичу. Для взятия препарата для исследования используются глазные стеклянные палочки с нанесенным на них специальным клеем для захвата яиц остриц.
Соскоб ватным тампоном. Чаще используется у взрослых.

Нельзя ходить в туалет (то есть совершать акт дефекации и мочится). Запрещены любые гигиенические процедуры: подмывание, подтирание салфеткой.

Забор делается в домашних условиях. Для этого применяют наборы, которые выдает врач, лаборатория, или они самостоятельно приобретаются в аптеке. Их два вида:

со специальной пластиковой пробиркой;
с предметным стеклом с наклейкой.

Алгоритм сбора набором со специальной пробиркой:

Вымыть руки.
Надеть латексные или целлофановые перчатки.
Палочкой, находящейся в пробирке провести по коже вокруг ануса.
Поместить палочку обратно в пробирку.
Плотно закрыть крышкой.
Выкинуть перчатки. Тщательно вымыть руки.
Доставить пробирку в лабораторию.

Алгоритм сбора набором с предметным стеклом:

Надеть перчатки.
Аккуратно отклеить ленту. Касаться клейкой части нельзя.
Наклеить вокруг анального отверстия.
Через 2-3 секунды отклеить.
Поместить ленту на предметное стекло.
Убрать в пакет.
Выкинуть перчатки и тщательно вымыть руки.
Доставить предметное стекло в лабораторию.

Методы выполнения анализа

Для развернутой гельминтоовариооскопии используют метод Като (метод «толстого мазка»). В нем применяют гидрофильный целлофан, которым накрывают мазок, а также раствор для осветления, состоящий из Малахитовой зелени, Глицерина и Фенола.

Исследование часто проводят с одним из методов обогащения:

по Калантарян;
по Фюллеборну.

Оба метода заключаются в удалении с помощью солевых растворов крупных частиц кала и осаживании яиц гельминтов в осадке. Таким образом, количество яиц в микроскопируемом содержимом увеличивается, и повышается вероятность их обнаружения.

Оценка результатов

Для предотвращения получения ложноотрицательных результатов при наличии симптоматики и эпидемиологического анамнеза обследования назначаются несколько раз с перерывом в несколько дней.

Как правильно собрать и сдавать анализы кала на яйца глист

Анализ кала на яйца глист – прямой способ для их определения. Можно выявить самих глистов и простейших их форм – цист, личинок и вегетативных форм. Если при обнаружении были обнаружены гельминты и простейшие их формы, дополнительные исследования назначаются в редких случаях.

Пренебрежение повторным анализом гарантирует то, что гельминтозы будут спокойно развиваться в организме.

Емкость для анализа

С процедурой взятия кала для анализа сталкивался каждый человек хотя бы один раз за свою жизнь. Произвести ее очень легко. Сама процедура несложная, однако есть ряд определенных правил, следование которым обеспечит более точный результат.

Анализ кала на глисты начинается с подготовки инструментов. Стерильная посуда – некритичное требование для того, чтобы сохранять стул. Специальные баночки можно приобрести в аптеке или подготовить их самостоятельно.
Чтобы сделать посуду стерильной, некоторые мамы ошпаривают ее кипятком. Для экономии средств испражнение можно поместить в обычную стеклянную баночку. Для этой цели подойдет даже пластмассовая посуда.
Чтобы обеспечить хорошую герметизацию, обязательное наличие крышек. Их всегда можно приобрести в аптеке, если нет желания мастерить что-то самому.
Аптечные емкости имеют в наборе ложечки. С их помощью помещают экскременты в емкость, что упрощает забор кала.
Некоторые поликлиники, проводящие анализ кала на яйца глист, выдают такие баночки бесплатно, взяв при этом плату за саму процедуру. В подобных емкостях спокойно можно хранить кал некоторое время до начала анализа.
Лаборатория не будет исследовать собранный стул, если он был принесен в коробках из картонной бумаги и подобных приспособлений.

Правила сдачи кала

Конечно, сделать это взрослому человеку легко, но даже такая простая процедура требует соблюдать правила сдачи.

Перед тем как сдавать кал, следует отказаться от приема слабительных средств, не делать клизм и не ставить свечи – это влияет на достоверность результата.
Собирающийся кал, который будет отправляться на анализ, не должен содержать в себе инородные жидкости – сточную воду, мочу, средства личной гигиены и любые другие выделения. Чтобы исключить попадание различных жидкостей, нужно использовать небольшой лоток.
Многие люди не знают, как правильно собрать кал, и делают ошибки. Материал на анализ собирается с различных участков. Готовое количество не должно превышать двух чайных ложек.
Лучше собрать анализ после того, как человек помочился. Особенно это касается маленьких детей.
У малышей собирать кал можно прямо из памперса.
Перед процедурой необходимо подготовить небольшую емкость с крышкой, после чего собрать кал, закрыть крышкой и подписать. Достаточно указать инициалы и дату забора.

Сдача и хранение

Лучше всего анализ делать в день сбора кала, но не все люди могут похвастаться регулярностью процесса. В отличие от мочи, кал годный более длительное время. Делают это с вечера – за сутки до исследования. Хранить кал на яйца глист можно только в закрытой емкости при температуре от 5 до 8 градусов.

В зимнее время подойдет хранение на подоконнике, а летом – в холодильнике. После этого доставка материала в лабораторию должна осуществиться как можно скорее.

Сколько делают анализ

Делается анализ кала в лаборатории. На изучение может понадобиться несколько дней. Готовый результат указывается на специальном бланке, который будет свидетельствовать о наличии или отсутствии глистов. После получения результатов больной готовится к дальнейшему исследованию.

Даже если при сборе кала на яйца глистов результат отрицательный, это не значит, что человек полностью здоров. В некоторых случаях личинок гельминтов не сразу получается обнаружить в испражнениях. Это объясняется тем, что яйца не всегда могут выходить с отходами.

В каких случаях может проводиться исследование

Рассмотрим, как сдавать анализы кала на яйца глист и в каких случаях это необходимо.

Энтеробиоз, который сопровождается следующими симптомами:

слизь и кровь в испражнениях;
позывы к рвоте;
тошнота;
боли в животе.

О чем говорит результат анализа

Срок действия анализа кала на яйца глист ограничен, поэтому важно провести процедуру вовремя и получить действительный результат. Расшифровка не вызывает трудностей – даже обычный человек может понять, каким оказался анализ. Лечащий врач делает на бланке указание «Обнаружено» или «Не обнаружено».

круглые черви, вызывающие энтеробиоз;
ленточные черви;
нематоды.

Если результат оказался отрицательным, исследование кала на простейшие и яйца гельминтов повторяется еще 2 раза через каждые 4 дня. Только после этого можно рассматривать окончательный результат.

Особенности анализа

Аскаридоз

Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов с помощью микроскопа свидетельствует о том, что болезнь находится в кишечной стадии. Кал на яйца глист, личинки которых находятся в мокроте, говорят о фазе миграции. Большое содержание в крови – повышенный уровень специфических антител.

Дуоденальное содержимое с яйцами аскарид – наличие гельминтов в панкреатических протоках.

Энтеробиоз

При анализе на энтеробиоз необязательно использовать каловый метод. Но как собрать при этом материал? На самом деле все очень просто: надо использовать специальную ватную палочку. Называется эта процедура соскобом перианальных складок. Энтеробиоз ставится в том случае, если в результате анализа были обнаружены яйца остриц.

Обнаружить яйца можно не сразу, поэтому анализ на яйцеглист проводят несколько раз подряд. Между процедурами должно пройти от 4 дней до недели.

Лямблиоз

Анализ кала на гельминты помогает выявить лямблий. После сдачи кала проводится повторное микроскопическое исследование.

Заключение

Мы подробно рассмотрели, как нужно сдавать анализ кала на яйца глистов. Процедура несложная, но это не значит, что можно забыть правила сбора. Не забывайте о том, сколько можно хранить фекалии перед исследованием.

Вы даже что-то читали о лекарствах, призванных победить заразу? И в этом нет ничего удивительного, ведь глисты смертельно опасны для человека – они способны очень быстро плодиться и долго жить, а болезни, которые они вызывают, проходят тяжело, с частыми рецидивами.

Плохое настроение, отсутствие аппетита, бессонница, дисфункция иммунной системы, дисбактериоз кишечника и боль в животе… Наверняка вы знаете эти симптомы не понаслышке.

Гельминтозы или глистные инвазии очень распространены среди населения. Согласно статистике, зараженность в западноевропейских странах достигает 50%, в России – 70%. Но наибольшая заболеваемость гельминтозами выявлена при выборочном обследовании населения юго-восточных и африканских государств, где она приближается практически к 100%.

Состояние здоровья у таких людей ухудшается: появляются симптомы различных хронических заболеваний – гастрита, гепатита, развивается анемия, аллергические реакции и другая патология. И сколько бы ни проводилось лечение, оно безуспешно, потому что не выявлена истинная причина болезни. Кроме того, они являются «ходячей инфекцией», подвергая опасности заражения других людей, особенно если в окружении есть ребенок.

Дети, ввиду своей активности и неосведомленности, быстро «подхватывают» инфекцию, не менее активно ее распространяют, и нередко тяжело заболевают. А таблетки от глистов для детей довольно часто бывают очень токсичными, вызывают побочные явления.

Поэтому выявление яиц глистов в кале, рано начатое лечение предупреждают как развитие осложнений гельминтоза, так и заражение окружающих. На основании результата анализа также подбираются глистогонные средства для людей в индивидуальном порядке.

Кому показано исследование на яйца глистов?

Исследование кала на заражение глистами проводится в 3-х случаях:

При подозрении на гельминтоз.
Профилактическое или «барьерное» обследование.
По желанию пациента.

Подозрение на гельминтоз

Заподозрить глистную инвазию (заражение) можно на основании следующих симптомов:

нарушение работы кишечника (вздутие, запоры, поносы);
неприятные ощущения в животе – урчание, покалывание;
общая слабость, недомогание, плохой сон;
повышенная нервозность, возбудимость, особенно у ребенка;
бледность кожи;
снижение веса;
наличие аллергических высыпаний на коже и слизистых оболочках;
ухудшение зрения.

«Барьерное» обследование

Согласно приказу Минздрава, это обследование обязательно должны проходить следующие категории людей:

направляемые на работу в детские учреждения;
оформляющиеся в предприятия общественного питания, торговую сеть, учреждения массового пребывания людей – санатории, интернаты, дома отдыха;
идущие на работу в сферу коммунальных и бытовых услуг;
оформляющиеся в медицинские учреждения – весь персонал, в косметологические и массажные кабинеты, фитнес-клубы, бассейны, парикмахерские;
проходящие обследование для госпитализации, на операции, для санаторного лечения.

На всех лиц этих категорий оформляется санитарная книжка, куда вносятся результаты медицинского обследования, в том числе и на зараженность глистами. При его обнаружении допуск к работе запрещен до излечения и повторного обследования. Подобный анализ также нужно сдавать во время прохождения этими же категориями людей периодических медицинских осмотров.

Обследование по желанию пациента

Любой человек, допускающий вероятность заражения глистами, может обратиться для обследования и сдавать анализ. Например, если ему довелось побывать в местах с плохими санитарными условиями, в местах большого скопления людей, или же он прибыл из юго-восточных и африканских стран.

Совет: если у вас выявлены яйца глистов, до завершения лечения и контроля следует избегать посещения людных мест, продуктовых магазинов, баров, ресторанов, избегать контакта с ребенком. Будьте гуманны, заботьтесь о здоровье окружающих.

Какие виды гельминтов можно обнаружить в анализе кала?

острицы (энтеробиоза);
аскариды человеческой;
власоглава (трихоцефалез);
трематоды (описторхоз, фасциолез);
ленточных червей (солитеров) – бычьего цепня, свиного цепня, гименолепидоза (карликового цепня), дифиллоботриоза (лентеца широкого).

Существует и множество других видов, не получивших большого распространения в наших широтах.

Как правильно собрать анализ?

Для правильного сбора анализа кала нужно соблюдать следующие требования:

Совет: далеко не всегда яйца глистов обнаруживаются с первого раза. Согласно правилам, проводится троекратное исследование с интервалом в 1 неделю, или же столько раз, сколько посчитает нужным врач.

Куда нужно обратиться, чтобы сдать анализ кала на обнаружение глистов?

Направить на обследование в лабораторию для выявления зараженности глистами может, в принципе, врач любой специальности. Взрослые, как правило, обращаются к терапевту, гастроэнтерологу или инфекционисту, в соответствии с жалобами. Ребенка направляет на исследование педиатр.

Анализ кала на яйца глистов – не единственное исследование, позволяющее выявить заражение. Но оно имеет место быть, с учетом высокой заболеваемости гельминтозами, и проводиться в строгом соответствии с правилами, а также с профилактической целью.

Видео

Методы прижизненной лабораторной диагностики гельминтозов:

— гельминтокопрологические исследования;

— гельминтоовоскопические исследования;

— гельминтоларвоскопические исследования;

— иммунобиологическая диагностика;

— диагностическая дегельминтизация и другие методы;

Методы посмертной диагностики:

— патологоанатомические исследования;

— полные и неполные гельминтологические вскрытия органов и тканей (ПГВ и НПГВ).

Прежде чем перейти перечисленных выше вопросов данной темы, считаю уместным дать определение понятия «инвазия» и «инвазионные болезни».

Инвазионные болезни могут протекать как в клинически выраженной форме со значительной смертностью, так и в скрытой (латентной) форме.

В диагностике инвазионных болезней решающее значение имеют лабораторные исследования, в результате которых устанавливается возбудитель.

Рассмотрим методы прижизненной диагностики гельминтозов. Для этого используют как макро- , так и микроскопические исследования, прежде всего фекалий, мочи, крови, дермы, содержимого полостей организма и др. Эти методы гельминто-диагностических исследований, направленные на отыскание и изучение самих гельминтов, их фрагментов Илии яиц и личинок наиболее доказательны и широко применяются для диагностики гельминтозов.

Материал для диагностических исследований должен быть свободен от всяких посторонних примесей и загрязнений, фекалии рекомендуется брать из прямой кишки животного, они должны быть свежими, их следует держать на холоде (не >5 о С), можно также консервировать 5-10 % раствором формалина или карболовой кислоты.

Гельминтоскопия – применяется для обнаружения в фекалиях целых экземпляров гельминтов или их фрагментов, особенно при исследовании на цестодозы кишечника. Этот метод используется также для контроля эффективности проведённой дегельминтизации, для учёта количества изгнанных гельминтов. Для этих исследований необходимо брать всю единовременную порцию фекалий, а с целью учёта эффективности дегельминтизации следует собирать все экскременты, выделенные животным в течение 2-4 суток после обработки. Собранные фекалии предварительно осматривают невооружённым глазом. Затем их помещают в металлический сосуд, разбавляют 5-10 кратным количеством воды, перемешивают и дают некоторое время отстояться, затем верхний слой сливают (до осадка) и снова добавляют воду. Эти манипуляции последовательного промывания и отстаивания проделывают несколько раз. Полученный осадок небольшими порциями исследуют в кюветках (чашках Петри) на белом и чёрном фоне. Всех видимых гельминтов выбирают иглой и исследуют под микроскопом, устанавливая вид.

Гельминтоовоскопия – это методы диагностики гельминтозов в результате обнаружения в материале яиц гельминтов. Для проведения таких исследований применяют следующее оборудование и средства: микроскоп биологический, предметные стёкла, чашки Петри, стакана стеклянные или пластмассовые (диаметром не > 4-5 см), мензурки объёмом 50 мл, фильтрационные ситечки (с капроновой сеткой, чулочной), стеклянные палочки, металлические петли с диаметром кольца 8-10 мм.

Для диагностических исследований используют флотационные растворы. Наилучшей флотационной способностью обладают растворы при температуре 20-22 о С. Плотность раствора уточняем денсиметром. Насыщенный раствор технической селитры или аммония нитрата с плотностью 1,32 (1500 г на 1 литр кипящей воды); натриевой селитры или натрия нитрата с плотностью 1,38 (соотношение соли и горячей воды 1:1); магния сульфата (сернокислая магнезия)с плотностью 1,26-1,28 (920 г на 1 литр горячей воды); натрия тиосульфата или гипосульфита натрия, плотностью 1,38-1,40 (1750 г на 1 литр кипящей воды); сульфат цинка плотностью 1,24 (400 г на 1 литр воды); поваренная соль, плотностью 1,2 (400 г соли в 1 литре воды нагревают до кипения), применяют в холодном состоянии.

Самый простой метод гельминтоовоскопического исследования фекалий – это метод нативного мазка. Небольшой кусочек фекалий помещают на предметное стекло, добавляют 2-3 капли смеси равных частей глицерина и воды, тщательно смешивают, покрывают покровным стеклом и смотрят под микроскопом. Этот метод ненадёжный, так как при слабой инвазии даёт отрицательный результат.

Метод последовательного промывания (метод осаждения, седиментации) применяют для диагностики трематодозов животных, яйца возбудителей которых имеют большой удельный вес и не улавливаются методом всплывания (флотации). Берут 5 г фекалий, смешивают с10 кратным количеством воды, фильтруют через сито или марлю и фильтрат отстаивают 5 минут. Далее жидкость сливают, а к осадку добавляют чистую воду и снова отстаивают 5 минут. До тех пор пока жидкость не станет прозрачной. Жидкость сливают, а осадок исследуют под микроскопом на наличие трематод.

Для диагностики нематодозов и цестодозов чаще всего используют флотационные методы. Наиболее распространённый и чаще применяемый – метод Фюллеборна. Для этого берут 10-20 г фекалий, помещают его в банку или стакан ёмкостью 100-200 мл, тщательно растирают стеклянной или деревянной палочкой в насыщенном растворе поваренной соли. Общее количество добавляемого раствора должно быть примерно в 20 раз больше количества фекалий. Затем фильтруем и оставляем на 30 минут. С поверхности отстоявшейся жидкости металлической петлёй снимаем плёнку и переносим её на предметное стекло, покрываем покровным стеклом и исследуем под микроскопом. Метод Щербовича используют для обнаружения яиц с более высокой плотностью (например, яйца метастронгилид), для чего используют насыщенный раствор сернокислой магнезии. Пробу фекалий (3-5 г) размешивают в воде до получения равномерной взвеси. Фильтруем через ситечко в центрифужную пробирку и центрифугируем 1-2 минуты. Верхний слой сливают, а к осадку добавляют насыщенный раствор сернокислой магнезии, хорошо размешиваем и снова центрифугируем 1-2 минуты. Затем металлической петлёй снимают верхнюю плёнку, помещают её на предметное стекло, накрывают покровным и исследуем под микроскопом.

Метод Котельникова и Хренова. Пробу фекалий (3 г) кладут в стакан и заливают небольшим количеством насыщенного раствора аммиачной селитры, размешиваем стеклянной (деревянной) палочкой и добавляем раствор до 50 мл. Взвесь фильтруем в другой стакан и оставляем на 10-15 минут. Снимаем петлёй 3-4 капли с поверхности, переносим их на предметное стекло и микроскопируем под малым увеличением микроскопа. Обнаруживаем яйца аскарид, трихоцефал, эзофагостом, стронгилоидесов, метастронгилид, неоаскарид, стронгилят органов пищеварения, мониезий и тизаниезий, параскарид, токсокарисов и др.

Метод Н.В. Демидова для диагностики фасциолёза. Пробу фекалий (3г от овец, 5 г от крупного рогатого скота), помещают в стакан, наливают насыщенный раствор хлористого натрия, тщательно размешиваем стеклянной палочкой, отстаивают 15-20 минут. С поверхности удаляют крупные частицы; жидкость отсасывают спринцовкой, или осторожно сливают, оставляют примерно 20-30 мл, к осадку добавляют воду до полного объёма стакана, тщательно размешивают, фильтруют через сито или 1 слой марли; жидкость снова отсасываем, оставляя 15-20 мл осадка; осадок переливают в маленькие конические стаканы, отстаиваем 3-5 минут, жидкость отсасываем и на предметное стекло переносим осадок, исследуя его под малым увеличением микроскопа.

Метод Дарлинга комбинирует процедуры осаждения и флотации. Фекалий смешивают с водой и центрифугируют 3-5 минут. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку прибавляют жидкость Дарлинга (глицерин с насыщенным раствором хлористого натрия, 1:1), тщательно размешивают и вторично центрифугируют 3-5 минут. Металлической петлёй снимаем плёнку на предметное стекло, накрываем покровным и исследуют.

Есть ещё много модифицированных методов исследования с целью обнаружения яиц гельминтов. Существуют стандартизированные методы Фюллеборна, Щербовича и др. При всех исследованиях берут одинаковую посуду, одно и то же время отстаивают и центрифугируют пробы, пользуются петлями одинакового диаметра и, сравнивая число яиц в поле зрения микроскопа или в одной капле поверхностной плёнки до и после обработки животных, судят об эффективности проведённой дегельминтизации. Наиболее простой и достаточно точной является методика, предложенная М.Ш.Акбаевым с использованием сетки, изготовленной из фотоплёнки после рентгеновских снимков. Кроме того, используются количественные гельминтоовоскопические исследования.

Метод Стола. В 100 мл колбочку наливают вначале 56 мл воды и отмечают снаружи на уровне её мениска. Потом наливают ещё 4 мл воды и делают новую отметку. Воду выливают, а в градуированную колбочку наливают 56 мл 0,1н раствора едкого натра, добавляют столько фекалий, чтобы уровень жидкости достиг отметки 60 мл. (4 см 3 фекалий), всыпают 10-15 бусинок, тщательно взбалтывают. Сразу же после взбалтывания градуированной пипеткой набирают 0,075 мл или 0,1 мл смеси, наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом, подсчитывая число яиц гельминтов. Количество яиц в 1 см 3 (1 г) фекалий, найденное число яиц умножают на 200 (если исследовали 0,075 мл смеси) или на 150 (если 0,1 мл смеси).

Гельминтоларвоскопические исследования применяются для диагностики диктиокаулёза, мюллериоза и др. протостронгилидозов, а также стронгилятозов пищеварительного тракта жвачных и стронгилоидозов разных животных.

Метод Бермана и Орлова. 10 г фекалий помещают в воронки аппарата Бермана на металлической сетке или завёрнутые в кусочки марли. Заливают водой комнатной температуры и оставляют на 3-6 часов. За это время личинки выползают из пробы в жидкость и опускаются по трубке на дно пробирки. Жидкость из пробирки сливают и отсасывают. Осадок после встряхивания разливают на предметное стекло и микроскопируют при малом увеличении микроскопа. Личинки нематод подвижны и легко обнаруживаются.

Упрощённая модификация метода Бермана (по Шильникову). В стакан с водой кладут пробы фекалий и завёрнутые в марлевые салфетки. Через 3-6 часов пробы вынимают, жидкость отстаивают 10-15 минут, затем пипеткой отсасывают прозрачный слой воды. Затем каплю осадка пипеткой наносят на предметное стекло для микроскопии.

Метод седиментации с центрифугированием. (экспресс-методика по Котельникову и др.). 3-5 г фекалий кладут в пробирки с водой (20-25 о С) и центрифугируют (1000-1500 оборотов в минуту) 2 минуты. Затем воду сливаем, а осадок, встряхнув, выливают на предметное стекло и исследуют на наличие личинок.

Метод Вайда. На предметное или часовое стекло кладут несколько шариков фекалий от овец, коз и добавляют воды температурой 40 о С. Через 4о минут шарики удаляют и исследуют под микроскопом жидкость, оставшуюся на стекле на наличие личинок нематод. Обнаруженных разными методами личинок необходимо дифференцировать.

Исследование крови по Куликову. Из ярёмной вены набирают 20 мл крови и добавляют 2 мл 3,8 % водного раствора лимонно-кислого натрия и отстаивают в течение 20-25 минут. Образуется 3 слоя: нижний – осевшие эритроциты, средний – лейкоциты и личинки нематод и верхний – сыворотка. Тонкой пипеткой, берут содержимое среднего слоя, наносят его каплями на предметное стекло, накрывают покровным и смотрят под микроскопом.

Исследование крови крупного рогатого скота (по Стюарду). Кожу освобождаем от волос, место дезинфицируем. Пинцетом оттягиваем кожу и кривыми ножницами отрезают поверхностный слой. Помещают на предметное стекло в каплю физраствора и тщательно расщепляют препаровальными иглами. Жидкость исследуют под микроскопом.

Исследование кожи лошадей по Р.С.Чеботарёву. На холке, плече, других местах выбирают участок кожи размером 5 см 2 , дезинфицируем спиртом. Захватываем кожу в складку, отрезаем кусочек толщиной 3-4 мм и площадью 2-3 см 2 . Срезы помещают в пробирке и заливают 2-3 мл физраствора и оставляют на несколько часов в термостате при 36-37 о С или при комнатной температуре. Затем содержимое пробирки выливаем на часовое стекло и исследуют под микроскопом, с целью обнаружения личинок онхоцерков.

Иммунобиологическая диагностика. В практике используют аллергические реакции для диагностики тканевых гельминтозов или, так называемых, ларвальных цестодозов, таких как эхинококкоз, ценуроз, цистицеркозы, а также нематодозов как трихинеллёза. Для этого применяют внутрикожную пробу. В качестве антигена рекомендуют жидкость из личинок (пузырей) или экстракты из трихинелл и их личинок.

В настоящее время большое внимание уделяют разработке и использованию серологических реакций, используя в качестве антигенов живых личинок гельминтов. По этому принципу ставят реакции микропреципитации на живых личинках нематод при нематодозах, на церкариях — при трематодозах, на онкосферах и сколексах — при ларвальных цестодозах. Другой принцип серологических реакций связан с использованием соматических антигенов. Применяют реакции гемагглютинации и флоккуляции (агглютинации) с адсорбированными антигенами. В качестве адсорбентов используют кармин, бентонит и латекссинтетическая смола.

Разновидностью серологических реакций являются: реакция сколексопреципитации (РСкП), разработанная Р.С.Шульц и Р.Г.Исмагиловой для диагностики эхинококкоза овец. Другие реакции: РНГА, РЗГА и др.

Диагностическая дегельминтизация является методом макрогельминтоскопи-ческого исследования. Используют её при подозрении на мониезиоз, тизаниезиоз, авителлиноз жвачных, аноплоцефалидозы лошадей, тениидозы плотоядных, дрепанидотениоз водоплавающих птиц, аскаридоз свиней, аскаридиоз кур и др. небольшой группе животных; наиболее подозрительных в заболевании, вводят соответствующий антгельминтик в лечебной или заниженной дозе. За животными наблюдают и проверяют все выделенные экскременты с целью обнаружения гельминтов или их фрагментов, которые в дальнейшем исследуют.

И, наконец, методы исследования других органов.

Исследование мочи: при диоктофимозе почек, капилляриозе мочевого пузыря. Мочу следует предварительно просмотреть макроскопически или при помощи лупы на наличие гельминтов или их фрагментов. Мочу разбавляют пополам дистиллированной водой и центрифугируют 2-3 минуты, жидкость сливают, а осадок наносят на предметные стёкла и исследуют.

Исследование содержимого трахеи птиц: в ней хорошо видны сингамусы или циатостомы, которые обычно имеют яркокрасный цвет.

Исследование камеры глаза. Прижизненная диагностика сетариоза глаз лошадей и крупного рогатого скота — проводят макроскопическим исследованием передней камеры поражённого глаза, где можно видеть свободноплавающих сетарий (5-10 см) и хорошо просвечивает даже через помутневшую роговицу.

Исследование поверхностного соскоба с перианальных складок: палочку или спичку, смоченную 50 % водным раствором глицерина делают соскоб с перианальных складок с внутренней стороны корня хвоста и с области промежности. Соскоб переносят на предметное стекло в 2-3 капли глицерина (1:1 в воде), покрываем покровным стеклом и исследуем под микроскопом на наличие яиц оксиурат.

Методы посмертной диагностики гельминтозов

— патологогистологические исследования. Посмертная диагностика гельминтозов различных стадий их развития в органах и тканях животных. Наиболее совершенная методика гельминтологического вскрытия разработана К.И.Скрябиым. Различают полное и неполное гельминтологическое вскрытие.

Полное гельминтологическое вскрытие – наиболее надёжный метод, позволяющий производить как количественный, так и качественный учёт всех гельминтов, которыми инвазировано животное.

Суть данного метода: после снятия с трупа кожи, тщательно осматривают подкожную клетчатку, затем вскрывают грудную и брюшную полости и извлекают все органы систем: пищеварительную, дыхательную систему, кровеносную, мочеполовую и др.

Органы отделяют и исследуют порознь, при этом используют метод последовательных смывов. Паренхиматозные органы (печень, лёгкие, поджелудочная железа, почки и др.) помещают в отдельную посуду и превращают в фарш, разрывая руками или разрезая на мелкие кусочки ножом или ножницами. Далее этот детрит отмывают водой или физраствором, пользуясь методом последовательных смывов. Полученный осадок изучают небольшими порциями сначала в чёрных, а затем в белых кюветах или в чашках Петри на чёрном и белом фоне. Крупных гельминтов выбирают визуально, а мелких – при помощи ручной лупы с 8-10-кратным увеличением. Собирают гельминтов только кисточкой или препаровальными иглами, но не пинцетом и непальцами.

НПГВ – упрощённое гельминтологическое вскрытие, в процессе которого извлекают из органов и тканей лишь отдельных резко выделяющихся по размерам гельминтов. Его используют также для получения музейного материала.

Гельминтологические исследования объектов внешней среды. Сбор консервирование и пересылка гельминтов. Фиксация, окраска гельминтов и приготовление из них постоянных микропрепаратов. Приготовление музейных макропрепаратов. Лабораторная диагностика трематодозов. Диагностика: фасциолёза, дикроцелиоза, описторхоза, парамфистоматоза, простогонимоза птиц, эхиностомоза уток и гусей.

Чаще всего заражение гельминтами происходит через зараженную пищу, воду, а также через немытые руки.

Прямые и косвенные методы диагностики гельминтозов

На сегодняшний день разработано множество методов диагностики гельминтозов, однако всех их можно разделить на две большие группы: прямые и косвенные. К прямым методам диагностики относятся те исследования, которые позволяют непосредственно выявить гельминты, их фрагменты, личинки или яйца. Косвенные методы диагностики гельминтозов основываются на выявлении вторичных изменений, характерных для той или иной разновидности гельминтоза.

Самыми популярными прямыми методами диагностики гельминтозов являются макро- и микрогельминтоскопические методы исследований.

Макрогельминтоскопические методы исследования

Вопросы читателей

18 October 2013, 17:25 Добрый день. Уже около почти год ощущаю зуд вокруг анального отверстия. Никаких болевых ощущений. Подскажите к кому обратится и что это может быть? Спасибо

Задать вопрос

Микрогельминтоскопические методы исследования

Иммунологические методы исследования

Диагностики гельминтозов основаны на обнаружении в сыворотке крови специфических антител к тем или иным гельминтам. Для иммунологического исследования применяется метод непрямой гемагглютинации, иммуноферментного анализа, иммуноэлектрофореза, иммуноабсорбции и другие серологические методы исследований крови.

Иммунологические методы исследования применяются для диагностики альвеококкоза, эхинококкоза, цистицеркоза, аскаридоза, шистосомоза и других гельминтозов.

Анализ желчи и дуоденального содержимого

Биопсия

Электропунктурная диагностика

Электропунктурная диагностика основана на анализе сопротивления кожи при раздражении ее слабым электрическим током. Электропунктурная диагностика при подозрении на гельминтоз может проводиться двумя способами: по методу Фолля или с помощью резонансного тестирования.

Инструментальные методы исследования

При гельминтозах также проводится ультразвуковое исследование, ФЭДГС, и компьютерная диагностика. Эти методы позволяют определить степень вреда, нанесенного гельминтами, а также определить состояние отдельных органов.

Глава III. Диагностика гельминтозов и методы гельминтологических исследований

Необходимо обследовать на гельминтозы всех больных, обращающихся за медицинской помощью, и особенно больных, обращающихся к педиатру, терапевту и невропатологу с жалобами на явления со стороны желудочно-кишечного тракта, нервной системы и с анемией. Если врач не всегда может применить лабораторные методы исследования, то опросить больного о выделении у него гельминтов обязан каждый медицинский работник, оказывающий помощь в амбулатории или стационаре.

При наличии приведенных в соответствующих главах клинических показаний следует уточнить диагноз при помощи лабораторных методов исследования на гельминтозы.

В связи с преобладанием кишечных гельминтозов наибольшее практическое значение имеет исследование испражнений.

Методы исследования испражнений на гельминтозы

Испражнения доставляются в лабораторию в чистой стеклянной посуде (около четверти стакана испражнений, взятых из разных мест одной порции); при плановом обследовании допускается доставка испражнений в лабораторию в спичечных или лубочных коробочках.

Для контроля дегельминтизации доставляется (по назначению врача) вся порция испражнений, собранная после приема противоглистного средства и слабительного (в больших закрытых стеклянных банках, ведрах).

Микроскопическое исследование испражнений является основным при диагностике кишечных гельминтозов; ему всегда должен предшествовать общий макроскопический осмотр фекалий для обнаружения члеников крупных цестод, остриц, аскарид и др.

Испражнения должны быть свежими или консервированными (в 5% растворе формалина), так как высыхание резко изменяет структуру яиц. Кроме того, при стоянии фекалий происходит быстрое развитие яиц некоторых гельминтов (например, анкилостом), что затрудняет диагностику.

Согласно инструкции Министерства здравоохранения СССР, необходимо исследовать испражнения одновременно по методу Фюллеборна и нативного мазка.

Нативный мазок

Нативный мазок: небольшой кусочек фекалий (с горошину), взятый спичкой, стеклянной или деревянной палочкой из разных мест доставленной порции, тщательно растирают на предметном стекле в капле 50% раствора глицерина или в физиологическом растворе, или в воде. Накрывают покровным стеклом, слегка надавливая последнее (препаровальной иглой). Мазок должен быть тонким, прозрачным и равномерным. Он применяется лишь как дополнение к другим методам, дающим обогащение препарата. Просматривать следует не менее двух препаратов.

С целью обнаружения личинок гельминтов (а также яиц их) нативный мазок делается следующим образом (по Шульману): 2-3 г фекалий тщательно размешивают «закручиванием» стеклянной палочкой в эмульсию с пятикратным количеством чистой воды или физиологического раствора. Во время размешивания личинки скопляются у стеклянной палочки, поэтому тотчас после окончания размешивания каплю эмульсии быстро переносят стеклянной палочкой на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют. С. Д. Любченко (1936) доказала, что метод закручивания является более эффективным, чем метод мазка, особенно в отношении яиц аскарид. На основании работы С. Д. Любченко мы считаем целесообразным заменить метод мазка методом закручивания.

Метод Фюллеборна

Метод Фюллеборна: 5-10 г фекалий, взятых из разных мест, помещают в баночку емкостью в 50-100 мл и тщательно растирают стеклянной или деревянной палочкой в насыщенном растворе поваренной соли (400 г этой соли растворяют в 1 л воды, нагревают до кипения и фильтруют через слой ваты или марли; раствор употребляется холодный: удельный вес 1,2). Раствор приливают постепенно, пока не получится равномерная суспензия, причем общее количество приливаемого раствора должно быть приблизительно в 20 раз больше количества фекалий. Для перемешивания фекалий Фюллеборн рекомендовал употреблять чайные стаканы, но удобнее готовить суспензию в баночках для мази емкостью в 50-100 мл, используя по две баночки на каждый анализ (или в стаканчиках емкостью в 100 мл).

Тотчас после приготовления суспензии с поверхности ее удаляют шпателем, металлическим совочком или кусочком чистой бумаги всплывшие на поверхность крупные частицы (растительные образования, непереваренные остатки пищи и пр), после чего смесь оставляют стоять на 1-1,5 часа. По истечении этого времени с поверхности смеси снимают всю пленку прикосновением проволочной или платиновой петли (плашмя) диаметром не больше 1 см, согнутой под прямым углом; пленку стряхивают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Под каждое покровное стекло (18х18 мм) помещают 3-4 капли. Всего следует приготовить не менее 4 препаратов (на каждый препарат - одно покровное стекло). Петлю прокаливают на огне и промывают водой после каждого анализа.

По методу Фюллеборна быстро и легко обнаруживаются яйца всех нематод (за исключением неоплодотворенных яиц аскарид) и яйца карликового цепня.

Метод Бермана применяется для исследования испражнений на личинки гельминтов (при стронгилоидозе). Этот метод заключается в следующем: 5 г фекалий на металлической сетке (для этих целей удобна цедилка для молока) помещают на стеклянную воронку, прикрепленную к штативу. На нижний конец воронки надевают резиновую трубку с зажимом.

Сетку с калом приподнимают и в воронку наливают нагретую приблизительно до 50° воду таким образом, чтобы нижняя часть сетки с калом была погружена в воду. Личинки активно переходят в воду и скопляются в нижней части резиновой трубки. Через 2-4 часа открывают зажим и жидкость спускают в одну или две центрифужные пробирки.

После центрифугирования в течение 1-2 минут верхнюю часть жидкости быстро сливают, а осадок наносят каплями на предметные стекла и исследуют под покровными стеклами или распределяют тонким слоем на 2-3 больших стекла и тогда исследуют без покровных стекол.

Метод Бермана применяется также и для исследования почвы на наличие личинок анкилостом.

Метод Столла

Метод Столла применяется для определения интенсивности инвазии. В специальную стеклянную колбочку наливают децинормальный раствор едкого натра до метки 56 см 3 , а затем прибавляют испражнения до тех на пор, пока уровень жидкости не достигнет 60 см 3 , т. е. 4 см 3 . После взбалтывания со стеклянными бусами берут для исследования 0,075 мл смеси и исследуют под одним-двумя обычными покровными стеклами. Полученную сумму умножают на 200, чтобы получить количество яиц, содержащихся в 1 см 3 испражнений.

Исследование дуоденального содержимого

Дуоденальный сок и пузырную желчь, полученные обычным путем при помощи зондирования (а пузырную желчь и после рефлекса с желчного пузыря), тщательно смешивают с равным объемом этилового эфира; смесь центрифугируют, после чего осадок исследуют под микроскопом. Помимо осадка, микроскопическому исследованию обязательно подвергаются плавающие в жидкости хлопья, в которых могут находиться яйца гельминтов. При исследование на яйца гельминтов желудочного сока и рвотных масс можно пользоваться этой же методикой.

Исследование дуоденального сока и содержимого желудка необходимо производить при подозрении на глистные заболевания печени, желчного пузыря (описторхоз, фасциолез, дикроцелиоз) и двенадцатиперстной кишки (стронгилоидоз).

Исследование мокроты

Мокроту растирают по стеклянной пластинке, плотно накрывают другой стеклянной пластинкой и рассматривают невооруженным глазом на светлом и черном фоне, а также под лупой при проходящем свете. Отдельные кусочки мокроты («ржавые» скопления, обрывки тканей и пр.) наносят тонким слоем на предметное стекло, плотно накрывают его покровным и исследуют при малом и большом увеличении микроскопа.

а) Для диагносцирования цистицеркоза кожи, подкожной клетчатки или мышц, асептически вырезанный кусочек соответствующей ткани исследуют сначала не вооруженным глазом. Участки тканей раздвигают при помощи препаровальных игл с целью обнаружения видимого простым глазом пузырька - цистицерка (фото А); длина его 6-20 мм, ширина 5-10 мм. При обнаружении пузырька, подозрительного на цистицерк, он раздавливается между двумя предметными стеклами и рассматривается под микроскопом. Цистицерк (Cistycercus cellulosae) определяется по наличию сколекса с четырьмя присосками и венчиком крючьев (фото Б).

Фото. А — цистицерки с вывернутыми наружу сколексами; Б — Головка свинного цепня.

б) Для диагносцирования трихинеллеза асептически вырезанный кусочек мышцы (двуглавой или икроножной) тщательно измельчают в 50% растворе глицерина на тончайшие волоконца с помощью препаровальных игл. Измельченные мышцы сдавливаются между двумя предметными стеклами и исследуются при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения. Исследование мышц на трихинеллез рекомендуется производить не ранее чем на 8-й день заболевания. Личинки трихинелл находятся в мышцах в свернутом спиралью положении: они заключены в лимонообразные капсулы.

Фото. А —Личинки трихинелл в мышцах; Б — Обызвествленные капсулы трихинелл.

Рентгеноскопия

Наиболее часто рентгеноскопия применяется для диагносцирования эхинококкоза и реже - цистицеркоза. Цистицерки обнаруживаются при рентгеноскопии только после обызвествления (в случаях длительного заболевания). За последние годы рентгеноскопия применяется и для диагносцирования аскаридоза как в ранней личиночной стадии, так отчасти и в кишечной стадии.

В период миграции личинок аскарид (и анкилостомид) в легких выявляются нестойкие, иногда множественные воспалительные очаги; одновременно в крови появляется значительная эозинофилия.

Половозрелые аскариды хорошо видны при рентгеноскопии кишечника пораженных лиц. Этот метод, несмотря на его сложность и громоздкость, должен быть использован как дополнительный для диагностики аскаридоза в случаях с отрицательным копрологическим анализом. По данным Е. С. Геселевич, из 180 больных аскаридозом, выявленных при рентгеноскопии, у 54 в кале не было обнаружено яиц аскарид (смотри ).