Методы исследований в микробиологии. Аллергологическое обследование Функциональные методы диагностики аллергии

Выберите рубрику Аллергические заболевания Симптомы и проявления аллергии Диагностика аллергии Лечение аллергии Беременные и кормящие Дети и аллергия Гипоаллергенный быт Календарь аллергии

Физикальное обследование

Включает осмотр пациента, пальпацию, аускультацию (прослушивание звуков, сопровождающих работу органов) и перкуссию (прослушивание звуков при простукивании определённых участков на теле пациента).

Лабораторная диагностика аллергии

Лабораторный метод диагностики аллергии определяет состояние организма по взятым у пациента анализам. Большинство методов базируется на ИФА (иммуноферментный анализ) — специфической реакции антиген-антитело. На ИФА основаны метод множественной хемилюминисценции и иммунофлуоресцентный метод на аппарате ImmunoCAP.

Биохимический анализ крови

Изучает состояние внутренних органов и систем, наличие воспалительных процессов, определяя химический состав крови.

Скрининговое аллергологическое обследование

Объект исследования — сыворотка крови. Проводятся ИФА тесты на основные группы аллергенов. Метод позволяет сузить круг поиска виновного аллергена.

Определение специфических IgG

Объект — сыворотка крови. LgG-тест ИФА проводят с индивидуальными антигенами для точного выявления виновного аллергена.

Показания: диагностика пищевой аллергии и непереносимости.

Интерпретация результатов:

• 50 Ед/мл — результат отрицательный;

• 50 — 100 Ед/мл — слабое нарушение толерантности;
• 100 — 200 Ед/мл — умеренное нарушение толерантности;
• более 200 Ед/мл — выраженное нарушение толерантности.

Исследование специфических антител IgE

IgE антитела отвечают за реакции немедленного типа. Определяются в сыворотке крови методом ИФА. Выявляется вызывающий аллергию агент.

Показания: невозможность выявить аллерген через анамнез, отказ от кожных проб, системные реакции в анамнезе, дерматит, гипо- и гиперреактивность кожи, количественная оценка антител, lgE-зависимая пищевая аллергия.

Забор крови производится из локтевой вены. За несколько дней до сдачи крови исключают аллергенные продукты из диеты и контакт с животными, прекращают приём антигистаминных препаратов. Анализ проводится в период ремиссии, кровь берут натощак..

Нормальное (референсное) значение lgE в крови — менее 0,35 МЕ/мл

При выявлении lgE-зависимой аллергии показана аллерген-специфическая иммунотерапия

Исследование газового состава крови

Определяется pH, парциальное давление О2 и СО2, количество бикарбоната в крови пациента.

Исследование гормонального профиля

В крови измеряется уровень гормонов коры надпочечников.

Клинический анализ мочи

Оцениваются физико-химические характеристики мочи: цвет, прозрачность, плотность, кислотность, химический состав. В осадке определяют наличие эпителия, эритроцитов, лейкоцитов, бактерий.

Копрограмма

Используется при диагностике пищевой аллергии.

Общий анализ мокроты

Применяется при диагностике дыхательной аллергии. Исследуются количество,консистенция, цвет, запах, характер (слизь, гной, кровь, серозная жидкость), флора, форменные элементы.

Ревматологические пробы

Объект — кровь. Анализируется уровень ревматологического фактора, фибриногена, С-реактивного белка и антистрептолизина. Метод позволяет установить наличие, локализацию и источник воспаления соединительной ткани.

Вирусологические исследования

Объекты : кровь, кал, мокрота, спинномозговая жидкость. Определяется присутствие вирусов в организме.

Бактериологический анализ мокроты и других выделений (секретов) со слизистых и кожи

Производится посев образца в питательную среду и последующий анализ выращенных колоний. Позволяет выявить и количественно оценить наличие возбудителей инфекционных заболевании.

Цитологическое исследование секрета, мазков или смывов из полости носа, слизистой конъюнктив и др

Метод состоит в исследовании под микроскопом клеток, находящихся во взятом образце, для выявления их морфологических патологий и поражений и их причин.

Специфические методы аллергологического обследования

Данная группа методов диагностики аллергии проводится на пациенте и направлена на выявления агента, вызывающего аллергию.

Кожные пробы (скарификационные)

Производится оценка местной реакции на контакт аллергена с кожей.

Существуют следующие виды кожных проб:

Показания: данные анамнеза, указывающие на аллергическую природу заболевания.

Противопоказания:

Так проводится патч-тест на аллергены (можно увеличить)

• Острая фаза аллергии;
• Острые инфекционные заболевания;
• Аутоиммунные, онкологические, системные заболевания;
• Заболевания крови;
• Нервные и психические болезни;
• Возраст менее 3-х лет;
• Беременность, кормление грудью;
• Приём антигистаминных бронхоспазмолитических и гормональных препаратов.

Причины ложных результатов:

• Нарушение технологии проведения пробы;
• Неправильное хранение препаратов аллергенов;
• Пониженная реактивность кожи;
• Приём антигистаминных препаратов.

Положительный результат указывает на сенсибилизацию организма, при совпадении с результатами анамнеза делается вывод об аллергической природе заболевания, при несовпадении проводятся дополнительные тесты.

При положительной реакции на пробу Манту проводится дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии, то есть определяется, что вызвало местную реакцию — палочка Коха или антитела без инфекции.

Тест проводится врачом-аллергологом, с применением растворов аллергенов, помещаемых на кожу предплечья. Одновременно наносится до 15 проб.

Фрагмент сюжета телеканала МИР — проведение прик-тестирования детям

Элиминационные тесты

На несколько недель исключается контакт пациента с вероятными аллергенами, что приводит у улучшению общего состояния. При возобновлении воздействия искомого аллергена у больного снова проявляются симптомы аллергии.

Таким образом можно точно определить вещество, вызывающее аллергическую реакцию. Метод наиболее эффективен при пищевой, лекарственной аллергии и контактных дерматитах.

Провокационные тесты

Аллерген наносится на слизистую оболочку органа-мишени, возникает местная аллергическая реакция.

При диагностике аллергии используются следующие виды провокационных тестов:

• Назальный (показания: полиноз, ринит): аллерген помещают в ноздрю;
• Конъюнктивальный: аллерген закапывают под нижнее веко;
• Подъязычный (пищевая аллергия): аллерген закапывают под язык;
• Ингаляционный (показания: бронхиальная астма): вдыхается аэрозоль препарата аллергена;
  • Ингаляционный тест с карбахолином : подтверждение диагноза бронхиальной астмы;
  • Ингаляционный тест с холодным воздухом : исследование неспецифической гиперреактивности бронхов;
• Дополнительные методы аллергологического обследования:
  • Дункан-тест (на холодовую аллергию): помещают на кожу кусок льда на 20 минут;
  • Тепловой тест (на тепловую аллергию): помещают на кожу предплечья бюкс с горячей водой (40 о С) на 10 минут.

Функциональные методы диагностики аллергии

Позволяют оценить работу физиологических систем организма посредством инструментального измерения внешних проявлений их работы.

При диагностике аллергии оценивают работу лёгких и дыхательных путей:

Проведение пикфлоуметрии при астме (можно увеличить)

• Пикфлуометрия — измерение пиковой скорости выдоха;
• Спирометрия и спирография — измеряются скоростные и объёмные характеристики дыхания;
• Пневмотахометрия — измерение скорости воздуха при форсированном вдохе и выдохе.

Инструментальные методы обследования

Арсенал инструментальных методов диагностики аллергии включает в себя:

• Переднюю риноскопию: диагностика поражений слизистой оболочке носа.
• Переднюю риноманометрию: измеряет сужение просветов носовых ходов вследствие назального аллерготеста.
• Эндоскопические исследования: осмотр внутренних органов посредством эндоскопа.

Кроме вышеперечисленных традиционных, существуют альтернативные методы диагностики аллергии.

Альтернативные методы диагностики аллергических заболеваний

Если аллергическое заболевание проявляется нехарактерными симптомами, или затруднена диагностика традиционными способами, прибегают к альтернативным методам диагностики аллергии.

Лейкоцитотоксический тест

Определяется количество лейкоцитов, несущих специфический антиген. Наличие антигена определяется по изменению внешнего вида лейкоцита при его реакции с подозреваемым аллергеном.

Aллергологический тест на выявление IgG в ИФА

Применяется при выявлении вызывающего аллергию агента и диагностике пищевой непереносимости.

Так выглядит проведение вегето-резонансного тестирования (можно увеличить)

VEGA-тестирование (электродермальное тестирование) метод Фоля (Voll)

Исследование электромагнитной проводимости в организме. Пониженная проводимость указывает на аллергический процесс.

Анализ волос и тестирование аллергии

Аурикулокардиальный рефлекс

Оценивается изменение пульса и кровенаполнения при контакте с аллергеном.

Для безошибочной постановки диагноза аллерголог при обследовании использует поочерёдно несколько из перечисленных методов диагностики аллергии.

Программа «Алло, доктор!». Современные методы молекулярной диагностики аллергии

Всем больным, страдающим атопическим дерматитом, должно быть как можно раньше проведено аллергологическое обследование, которое практически не имеет противопоказаний, за исключением обострения основного или других заболеваний. Диагностику следует проводить также в случае наличия у пациента других «аллергосимптомов» (эпизоды персистирующего кашля, в том числе ночью, после физической нагрузки; зуд и отек глаз и/или заложенность носа, насморк и т. п.). Аллергологическое обследование является обязательным для тех больных, которым предполагается назначить профилактическое лечение (специфическую иммунотерапию/аллерговакцинацию).

В целом аллергодиагностика имеет неоценимо важное значение с целью:
а) ранней идентификации детей из группы риска развития аллергических заболеваний;
б) назначения больному специфической терапии, в том числе элиминационной, соответствующей фармакотерапии, специфической иммунотерапии (аллерговакцинации).

У детей объем аллергологического обследования зависит от их возраста, семейной отягощенности атопией, провоцирующих факторов, симптомов заболевания и т.

п. История болезни включает данные о наследственной предрасположенности к аллергическим заболеваниям, погрешностях в питании беременной/кормящей матери, профессиональных вредностях у родителей, сроках введения прикорма и реакций на новый вид пищи у ребенка. Врач тщательно анализирует частоту и тяжесть симптомов заболевания, факторы окружающей среды (жилищно-бытовые условия, наличие животных, птиц, рыб в квартире, курение и т. д.), уточняет связь клинических проявлений с определенным сезоном года, местом пребывания ребенка (школа, вне дома); выявляет другие сопутствующие атопические заболевания (пищевая аллергия, аллергический ринит/конъюнктивит, бронхиальная астма). Особое внимание обращают на специфический аллергологический анамнез, который необходимо использовать для дальнейшей коррекции противоаллергической терапии, а также на аллергологический анамнез тех больных, у которых были выявлены позитивные кожные пробы. Врачи могут пользоваться также стандартным аллергологическим опросником.

Атопию (или IgE-сенсибилизацию) устанавливают на основании клинических симптомов заболевания и положительных кожных проб или повышенного уровня общего или специфических IgE-антител в сыворотке крови больного.

При назначении детям, страдающим атопическим дерматитом, кожных проб необходимо учитывать следующее:
в случае обострения заболевания и при локальном применении наружных кортикостероидов применение кожных проб ограничено;
следует отменить прием антигистаминных препаратов за 3 дня до постановки кожных тестов;
рекомендуется постановка кожных проб с использованием прик-метода. По мнению зарубежных исследователей, считается ошибочной рекомендация ограничить их постановку у детей до 3 лет. Результаты прик-тестов в значительной степени зависят от используемого экстракта и давления ланцета на кожу;
атопия считается доказанной при наличии хотя бы одной положительной пробы (средний диаметр папулы > Змм при негативном контроле) или > 2 баллов при серологическом обследовании.

По положительным результатам аллергологического обследования можно говорить лишь о том, что индивид сенсибилизирован. Эти данные приобретают высокую диагностическую значимость только при сопоставлении с историей болезни и клиническими симптомами. Сравнительный анализ чаще всего подтверждает наличие у больных атопией строгой корреляции между высоким уровнем специфических IgE-антител сыворотки крови и клиникой заболевания. Применительно к атопическому дерматиту результаты кожного аллергологического обследования зависят от возраста ребенка, используемых методов диагностики и степени тяжести заболевания.

У детей в возрасте до 3-4 лет одним из основных провоцирующих факторов развития атопического дераматита считается пищевая аллергия. В раннем возрасте чаще всего она проявляется кожными и гастроинтестинальными симптомами, крайне редко - респираторными. Основная причина пищевой гиперчувствительности - аллергия на белки коровьего молока, яиц, злаки и орехи. Дети с дермо-респираторным синдромом могут быть сенсибилизированы к ингаляционным аллергенам, и их необходимо обследовать на пылевые клещи, шерсть кошки (чаще всего).

С возрастом повышается сенсибилизация к ингаляционным аллергенам (клещи домашней пыли, аллергены животных, тараканы), позже - к внежилищным аллергенам (грибки, пыльца). Как правило, высокую частоту сенсибилизации выявляют у детей с атопической астмой и аллергическим ринитом/конъюнктивитом. Однако наболее высокий уровень сывороточного IgE отмечается у больных атопическим дерматитом по сравнению с поллинозом или бронхиальной астмой.

Типичный сезонный ринит и/или конъюнктивит (весной, летом) можно диагностировать без аллергологического обследования только на основании анамнеза больного. В дальнейшем таким пациентам обязательно проводят аллергологическое обследование с целью уточнения причинно-значимых аллергенов и назначения специфической иммунотерапии.

Существует множество способов диагностики аллергии. Правильный диагноз можно поставить только после комплексного обследования и никогда - после одного анализа. Комплексное аллергологическое обследование начинается с беседы с врачом-аллергологом. Врач расспрашивает о жалобах, о начале заболевания, особенностях его развития, об условиях, в которых аллергическая реакция выражена максимально, о наличии подобных заболеваниях у родственников, условиях быта и работы и т.п. После этого врач назначает определенные методы диагностики.

Кожные пробы

Обследование методом укола (прик-тестирование) или царапины (скарификационный тест) проводится для того, чтобы определить, какие аллергены могут иметь значение в развитии симптомов у конкретного человека. Это абсолютно безболезненные методы. Разница между ними несущественна, первый метод считается более безопасным.

Исследование, как правило, проводят на коже предплечья, которую предварительно обрабатывают спиртовым раствором. Далее, на чистую кожу наносят капли аллергенов. В случае скарификационных тестов, через капли аллергенов, одноразовым скарификатором, наносятся небольшие царапины. В случае прик-тестов используют одноразовые иглы, ими наносят легкие уколы (на один миллиметр в глубину). И в том, и в другом случае кровеносные сосуды не задеваются, то есть оба метода бескровные. Не ставят более 15 проб с аллергенами за один раз. Через некоторое время возможно развитие небольшого отека и покраснения кожи, что предполагает аллергию на соответствующее вещество.

Исследование специфических антител Ig E

Такой анализ на антитела, ответственных за развитие аллергии, помогает установить группу причинных аллергенов. Метод очень чувствительный, а полученная информация является по своей сути схожей с той, что получена в результате кожного тестирования. Для проведения этого анализа нужно будет сдать кровь из вены.

Провокационные тесты

Кожное тестирование и исследование крови на IgE указывают на те аллергены, которые потенциально могут вызвать аллергические реакции у данного человека. Если после кожных проб и исследования крови, диагноз остается неясным, врач может назначить провокационные тесты. Такие исследования проводятся в аллергологических стационарах по строгим показаниям. При проведении провокационных тестов в нос, под язык или непосредственно в бронхи вводится небольшое количество аллергена, а через некоторое время оценивается реакция. Такое исследование может вызывать у больного сильную аллергическую реакцию, поэтому должно проводиться в присутствии врача, который может оказать немедленную медицинскую помощь.

Элиминационные тесты

Если контакт с аллергеном постоянный, то для подтверждения того, что данный конкретный аллерген вызывает клинические проявления аллергии, используют элиминационные тесты. Элиминация - это удаление аллергена. Типичный пример элиминационного теста - элиминационная диета. Это диагностический прием, который заключается в полном выведении из рациона предполагаемого аллергенного продукта. Если после исключения продукта в течение 7 - 14 дней наступает видимое улучшение течения болезни, то можно говорить о том, что этот продукт является причиной аллергии.

Для диагностики аллергии и коррекции лечения врач может попросить вести специальный дневник, в котором больной будет отмечать время начала аллергии, проявления и возможную причину. Это позволить назначить профилактическое лечение или исключить контакт с аллергеном, например, в случае с аллергией на пыльцу или пищевой аллергией.

Лабораторные методы диагностики аллергии - это всего лишь часть комплексного аллергологического обследования. На их основании врач может предположить причину аллергии. Точный диагноз можно поставить только при совокупности всех данных: опроса, осмотра, лабораторных данных и реакции на лечение.

Капельная проба.

Для постановки кожных капельных проб применяются водные растворы веществ. Обычно употребляются невысокие концентрации аллергенов, например, 0,25% раствор новокаина, 50000 пенициллина. Каплю раствора аллергена наносят на неповрежденную кожу (волярную поверхность) предплечья, живота. Параллельно ставят контрольную капельную пробу с растворителем (физиологическим раствором или дистиллированной водой).

Результаты капельной пробы регистрируются через 20 минут и спустя сутки с момента нанесения испытуемого раствора лекарственного вещества. Если в месте нанесения лекарства есть гиперемия, отек, то реакция положительная, данный препарат назначать нельзя.

Аппликационная кожная проба.

Аппликационные кожные пробы делают на волярной поверхности предплечья, на животе, спине. При этом на кожу накладывают марлю размером 2х2 см, смоченную раствором исследуемого лекарственного вещества. Сверху марли накладывают компрессную бумагу или целлофан, затем наклеивают кусок лейкопластыря 4х4 см. Аналогичным образом делают и с контрольным растворителем (физ.раствором).

Результаты оцениваются через 24-72 часа следующим образом: гиперемия (+); гиперемия, отечность, образование папул (++); яркая эритема, отечность, папулы, везикулы (+++); образование крупных пузырей и некроза (++++). Лейкопластырь в местах непосредственного контакта с кожей, как правило, вызывает раздражение кожи (непосредственная реакция-гиперемия, отек), поэтому оценивать нужно только участок кожи, непосредственно соприкасающийся с марлей, смоченной раствором лекарственного препарата.

В случае резкого нарастания аллергической реакции (появление зуда, чувства жжения и т.д.) пробу следует быстро снять и обмыть кожные покровы, и данное лекарство не назначать.

Скарификационная кожная проба.

Перед постановкой этой пробы - кожу (спины, живота или внутренней поверхности предплечья) следует обработать спиртом. Затем на расстоянии 5 см друг от друга наносят каплю 0,01% раствора гистамина (положительный контроль), каплю испытуемого лекарственного аллергена и каплю разводящей жидкости - физиологического раствора (отрицательный контроль). Стерильными иглами или скарификаторами наносят две поверхностные скарификации (не кровоточащие) в длину до 5-10 мм, на расстоянии 3 мм друг от друга. Реакцию оценивают через 20 минут, промокая капли аллергена отдельными ватными тампонами. Надо смотреть и через 24 часа (могут быть замедленные реакции).

Если на месте скарификации развивается гиперемия, а при натягивании кожи отек (побеление) в месте царапин, реакция слабоположительная (+).

Если волдырь с гиперемией в месте царапин виден на глаз, а при натягивании отек увеличивается, то реакция положительная (++).

Волдырь диаметром 10 мм с гиперемией и ложноножками свидетельствует о резко положительной реакции (+++).

Волдырь размером более 10 мм в диаметре с псевдоподиями и гиперемией показывает о реакции положительной в очень резкой степени (++++).

Провокационная подъязычная проба.

Перед проведением пробы осмотреть подъязычную область. Больному под язык дается 1/4 разовой терапевтической дозы испытуемого лекарственного препарата. При положительной пробе через 10-20 минут у больного появляется отек уздечки языка, отек губ, кожный зуд; единичные или распространенные уртикарные высыпания. При этом больной должен немедленно удалить оставшуюся часть препарата, прополоскать рот, не глотая жидкости, и принять антигистаминные.

Провокационная проба.

Пероральная:

Больному дается 1/4 разовой терапевтической дозы испытуемого лекарственного препарата. При положительной пробе в течение ближайших 2 часов могут появиться удушье, единичные волдырные элементы, повышение температуры. При этом больному дается солевое слабительное и назначаются антигистаминные препараты.

Парентеральная:

Четверть разовой дозы вводится внутримышечно в область бедра, если препарат вводится внутримышечно; п/к - в область предплечья, если препарат вводится подкожно и оценивается через 20 минут. При отрицательном результате через два часа вводится разовая доза. При проведении пробы с препаратом для внутривенного введения готовится раствор для внутривенного капельного введения и вводится медленно 10-20 капель в минуту в течении 2-5 минут. При отсутствии общих клинических симптомов и изменений гемодинамики введение лекарственного вещества продолжается.

Провокационные пробы проводятся врачом под контролем гемодинамики.

Тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов in vivo для специфической диагностики лекарственной аллергии (ТТЭЛ)

Для ТТЭЛ необходимы:
Оборудование: (на одно исследование)

1. 4 химических стаканчика емкостью 50 мл.

2. 5 пробирок емкостью 20 мл.

3. Штатив для пробирок (1).

4. 2 пипетки (1,0 и 10,0 мл.).

5. Микропипетки (2).

6. Счетная камера Горяева (1).

7. Часовое стекло (1).

8. Микроскоп бинокулярный (об.20, ок.7)

Реактивы:

1. Физиологический раствор рН 7,3-7,4 (рН раствора устанавливается добавлением 0,1 М NаОН при помощи потенциометра ПП-0,1).

2. 0,01% раствор красителя генцианового фиолетового в 3% уксусной кислоте.

Медикаменты:

Для исследования используются водорастворимые формы медикаментов в следующих концентрациях:

1. Пенициллин - 1 мк/мл.

2. Цефалоспорины (цефазолин, кофзол, цефамизин)-1 мкг/мл.

3. Аминогликозиды (стрептомицин, канамицин, гентамицин)-10 мкг/мл.

4. Макролиды (эритромицин)-10 мкг/мл.

5. Хлорамфеникол (левомицетин) -10 мкг/мл.

6. Тетрациклины -10мкг/мл.

7. Сульфаниламидные препараты-100 мкг/мл.

8. Производные пиразолона и ацетилсалициловой кислоты-100 мкг/мл.

9. Местные анестетики (новокаин, лидокаин, тримекаин)-100 мкг/мл.

10. Антибиотики других химических групп - 10 мкг/мл.

Если у больного в анамнезе отмечались анафилактические реакции на введение медикаментов, то независимо от названия лекарственного препарата исследования начинают с концентрации препарата 1 мкг/мл. В случае отрицательного результата тест повторяют с этим же медикаментом в дозе 10 мкг/мл, а если необходимо - то с дозой 100 мкг/мл.

В один день можно проводить только одно исследование с одним препаратом и с одной его концентрацией. Во время проведения теста запрещается принимать пищу, пить, курить, принимать лекарственные препараты. Тест проводится в процедурном кабинете.

До и после постановки ТТЭЛ in vivo врач тщательно осматривает больного, измеряет АД, ЧСС, частоту дыхания.

Обследование рассчитано на 1,5 часа и состоит из двух этапов.

I-й этап:

Подготовка материала к исследованию:

1. Через час после еды больной тщательно прополаскивает полость рта кипяченой водой для механической очистки ее в течении 2-х минут.

2. Спустя 30 минут после первого полоскания следует прополоскать передний отрезок полости рта 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) в течение 2-х минут.

3. Жидкость из полости рта (промывные воды) собирают в стаканчик №1, как исходную порцию (контроль).

4. Через 15 минут производится полоскание полости рта в течение 2-х минут физиологическим раствором с разведенной в нем исходной концентрацией испытуемого медикамента. Эта порция промывной жидкости собирается в стаканчик №2 и в дальнейшей работе не используется.

5. Еще через 15 минут вновь ополаскивают передний отрезок полости рта в течение 2-х минут 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) и промывную жидкость собирают в стаканчик №3.

6. После этого через 15 минут передний отрезок полости рта ополаскивают в течение 2-х минут 10 мл физиологического раствора (рН 7,3-7,4) и собирают промывную жидкость в стаканчик №4.

II-й этап:

Окраска и подсчет лейкоцитов в собранном материале. Приготовление и просмотр окрашенных мазков.

1. Промывную жидкость из полости рта в стаканчике №1 (контрольная порция) после получения тотчас тщательно перемешивают микропипеткой и в количестве 0,2 мл помещают на часовое стекло.

2. Туда же добавляют 0,04 мл раствора красителя генцианового фиолетового.

3. Через 5 минут исследуемую смесь помещают под притертое стекло камеры Горяева.

4. Подсчет лейкоцитов проводиться в 100 больших квадратах камеры Горяева и рассчитывает количество лейкоцитов в 1 кубическом мм.

Таким же образом подсчитывают количество лейкоцитов в стаканчиках № 3 и 4 (опытные порции)

Индекс эмиграции лейкоцитов в полости рта рассчитывают по формуле:

ИЭ =

х100%

111 Нк – Но 111

где Нк-количество лейкоцитов (нейтрофилов) в первой, исходной порции, Но-количество лейкоцитов (нейтрофилов) в опытных стаканчиках №3 и 4.

Тест оценивается как положительный при снижении числа клеток по индексу эмиграции более, чем на 30%.

Приложение №5 .

Специфические методы аллергологической диагностики

Кожные пробы

Кожные пробы нашли самое широкое применение как метод определения аллергена. Метод малотравматичен, относительно безопасен и довольно специфичен (т. е. с высокой долей достоверности можно определить причинный аллерген). Сочетание тщательно собранного анамнеза с хорошо продуманной обширной программой кожных проб является основой диагностического подхода к аллергологическим проблемам. В основном кожные пробы применяются для выявления специфических аллергенов при заболеваниях, вызванных реакциями гиперчувствительности немедленного типа (I тип). К таковым можно отнести аллергический ринит, астму, атопическую экзему, анафилаксию, крапивницу. На кожу больного воздействуют небольшим количеством аллергена, чем вызывают развитие аллергической реакции в миниатюре. Кожные пробы ставят, как правило, в период ремиссии. Методики выполнения кожных проб могут быть различны: насечки, уколы, внутрикожное введение аллергена, лекарственный электрофорез. Таким образом, по выбранному методу проба может быть кожной и внутрикожной. Основными целями кожных проб являются:

– выявление основных аллергенов, не установленных по данным анамнеза аллергического заболевания;

– подтверждение наличия аллергенов, предполагаемых на основании данных аллергологического анамнеза.

Метод кожных проб основан на наличии антител не только в шоковом органе, но и в коже (реагины). Поэтому при встрече с «родственным» аллергеном происходит аллергическая реакция с высвобождением гистамина и образованием волдыря или воспалительной аллергической гиперемии. В настоящее время известно большое количество диагностических аллергенов как инфекционного, так и неинфекционного ряда. Кожные пробы противопоказаны в период обострения аллергического заболевания, основного (неаллергического) заболевания, во время лечения гормонами и антигистаминными препаратами (так как эти медикаменты могут искажать (снижать) кожную чувствительность). Интенсивность кожных проб оценивают либо плюсами (от 0 до 4), либо по диаметру «пуговки», или очага гиперемии (покраснения кожи).

Учитывая возможность развития серьезных осложнений, вплоть до анафилактического шока, при несоблюдении техники постановки кожных проб, а также сложность интерпретации полученных результатов, проведение кожных проб возможно только в аллергологических кабинетах специально обученным персоналом под наблюдением врача-аллерголога.

Провокационные пробы

Помимо кожных проб, для диагностики в аллергологии широко используются провокационные пробы в виде специальных тестов. При помощи провокационных проб (тестов) выявляют (уточняют) причиннозначимый аллерген. В основе тестов лежит введение аллергена в шоковый орган. Если аллерген причиннозначим, значит, происходит реакция аллергического воспаления. Шоковым органом называется тот орган, поражение которого является ведущим в картине заболевания. По виду шокового органа выделяют следующие виды провокационных проб:

I. Конъюнктивальный провокационный тест, применяемый для выявления аллергенов, вызывающих развитие аллергического конъюнктивита или поллиноза, протекающего с явлениями конъюнктивита. Необходимо соблюдать осторожность при его проведении из-за опасений вызвать резкую воспалительную реакцию. Противопоказания те же, что и для кожных проб. В конъюнктивальный мешок, отодвинув нижнее веко, закапывают несколько капель тест-контрольной жидкости. Затем веки можно сомкнуть. При отсутствии воспалительной реакции закапывают капли аллергена (в разведении). При появлении зуда, воспаления век, слезотечения тест считается положительным.

II. Назальный провокационный тест считается наиболее безопасным. Проводится преимущественно при поллинозах с клиническими проявлениями ринита и аллергических ринитах. Эта проба проста и легковыполнима в условиях аллергологического кабинета. Противопоказания – как и у кожных проб. Аллерген (после предварительного введения тест-контрольной жидкости) в соответствующем разведении закапывают в одну половину носа. При положительной реакции появляются чиханье, зуд в носу, затрудненное дыхание через данную половину носа. При специальном осмотре слизистой данной половины носа (при риноскопии) можно определить набухание слизистой оболочки носа, сужение носового прохода.

III. Ингаляционный провокационный тест обычно применяется для специфической диагностики различных форм бронхиальной астмы. Тест выполняется строго в условиях стационара, так как возможно развитие тяжелого приступа бронхиальной астмы сразу или через несколько часов, поэтому за тестируемым необходимо наблюдение. Этот тест наиболее специфичен (т. е. с большой достоверностью позволяет выявить причиннозначимый аллерген), так как аллерген вводят естественным путем. Для того чтобы аллерген попал на слизистую оболочку дыхательных путей, он должен быть распылен, после чего больной вдыхает его. В ответ на попадание аллергена в шоковый орган (легкие) возникает бронхоспазм, который свидетельствует о причинной значимости аллергена. Детям этот тест проводят лишь с 4-5 лет с большой осторожностью и предварительной подготовкой. Для снятия возникшего во время исследования бронхоспазма необходима ингаляция одного из бронхоспазмолитических препаратов («беротек», «вентолин» и др.).

Существуют и другие виды провокационных тестов, такие как холодовой, тепловой, лейкоцитопенический, тромбоцитопенический, экспозиционные.

С помощью провокационных тестов хорошо выявляются атопический и иммунологический типы аллергических реакций. Труднее диагностируется аллергическая реакция замедленного типа.

Элиминационные пробы

Это способ выявления возбудителя аллергии (причиннозначимого аллергена) основан на исчезновении или ослаблении аллергической реакции после прекращения контакта больного с аллергеном. Элиминационные тесты были предложены для диагностики пищевой аллергии и нашли широкое применение в детской практике. Как показывает само название, проба связана с исключением из диеты больного подозреваемого аллергена. Необходимо исключить из рациона не только подозреваемый аллерген в чистом виде, например яйцо, но и блюда, содержащие его (булки, печенье, кремы, омлеты и т. д.). Второе необходимое условие чистоты эксперимента – это длительность элиминации (не менее 7-12 дней). Обычно элиминационный тест используется в диагностике пищевой и (реже) лекарственной аллергии. После наступления ремиссии (исчезновение проявления болезни) этот тест сочетают с применением провокационного теста с данным аллергеном.

Лабораторные методы диагностики

Лабораторные методы диагностики аллергических заболеваний в отличие от вышеперечисленных клинических методов диагностики имеют ряд преимуществ, так как не связаны с введением подозреваемого аллергена в высокочувствительный организм. А значит, они полностью безопасны для пациентов. Приоритетное значение лабораторные методы диагностики имеют тогда, когда не удается добиться периода ремиссии, а выявить аллерген крайне необходимо.

При использовании методов лабораторной диагностики (другими словами, иммунологических методов исследования) необходимо учитывать некоторые положения. Во-первых, все иммунологические методы диагностики выявляют лишь состояние сенсибилизации, т. е. свидетельствуют о том, что у данного человека когда-то уже был контакт с данным аллергеном. Из этого вовсе не следует, что именно на данный аллерген разовьется аллергическая реакция, потому что для реализации аллергии необходим еще ряд дополнительных условий. Во-вторых, у разных типов иммунологических реакций имеются различные иммунологические механизмы, поэтому для диагностики необходимо применять несколько методов. К наиболее простым методам относятся методы, основанные на реакциях клеток крови, так как клетки крови могут быть носителями антител (лимфоциты) и фиксировать на себе комплекс «антиген – антитело» (тромбоциты, эритроциты, зернистые лейкоциты, базофилы). На этих свойствах клеток крови основаны некоторые методы лабораторной диагностики, например тест на выброс веществ воспаления из базофильных лейкоцитов, тучных клеток соединительной ткани и др. Диагностическая значимость указанных методов далеко не равнозначна. Их применение определяется задачами исследования, характером процесса и другими факторами. Итак, подытоживая все вышесказанное, ответим на вопрос: как же распознать аллергию? Как уже отмечалось, часто распознавание аллергических реакций и заболеваний не представляет большой трудности. Когда больной обращается за медицинской помощью, ему необходимо рассказать доктору:

– о характере течения заболевания и его тяжести;

– о своих жалобах, т. е. о субъективных ощущениях;

– о том, как протекают приступы аллергии – сезонно или непрерывно;

– о том, на какие виды пищевых продуктов и лекарств бывают аллергические реакции;

– о том, есть ли дома домашние животные, птицы, аквариум, имеется ли и с какой частотой контакт с пылью, косметическими средствами, инсектицидами и т. д.;

– о состоянии пищеварительного тракта (есть ли запоры, поносы);

– о том, бывают ли и как часто головные боли, охарактеризовать их длительность и локализацию;

– об очагах хронической инфекции (хронический гайморит, отит, кариозные зубы, наличие глистной инвазии, лямблиоза и т. д.);

– обо всех перенесенных болезнях и лекарствах, которыми их лечили, о реакциях на инъекции иммуноглобулинов; о наличии или отсутствии в анамнезе жизни (т. е. в истории жизни) внутривенных переливаний крови и ее препаратов.

Заключение о типе процесса и его причине дается на основе обобщенных результатов анамнеза, клинического обследования и указанных методов исследования.

Из книги Секреты целителей Востока автора Виктор Федорович Востоков

Методы диагностики На протяжении многовекового развития народной медицины восточные целители разработали своеобразные методы обследования больных и диагностирования болезней. Многие из этих методов используются и в современной медицине.Вначале их было четыре:

Из книги Мы хотим ребенка. 100% беременность! автора Елена Михайловна Малышева

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ Как и в любой другой болезни, лечение бесплодия во многом зависит от своевременной и правильной постановки диагноза. К счастью, на сегодняшний день диагностика бесплодия в семье представляет собой тщательно изученный и отработанный

Из книги Болезни молочной железы. Современные методы лечения автора Елена Витальевна Потявина

Современные методы диагностики Известно, что рак не возникает внезапно, а спустя 5, 10, а то 20 лет после предшествующих хронических заболеваний. По данным Санкт-Петербургского ГУН НИИ онкологии имени профессора Н. Н. Петрова, рак молочной железы развивался на почве

Из книги Болезни желудка и кишечника автора Юлия Попова

Методы диагностики Для точной постановки диагноза эффективен комплексный подход. Он позволяет установить тяжесть заболевания, локализацию поражения кишечника, степень и характер изменений. Для этого используют ректороманоскопию, колоноскопию, ректороманобиопсию,

Из книги Заболевания позвоночника. Полный справочник автора Автор неизвестен

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ОСТЕОПОРОЗА К таким методикам прежде всего относят инструментальные и лабораторные методы исследований.Рентгенологическое исследование костей. Данная методика информативна лишь при изменениях, когда костная масса уже потеряна на 1/5-1/3 своей

Из книги Общая хирургия: конспект лекций автора Павел Николаевич Мишинькин

3. Основные методы лечения столбняка. Специфические и неспецифические методы лечения К неспецифическим методам лечения относится ряд мероприятий. В первую очередь это госпитализация больного в специализированный стационар с обязательным помещением в отдельную палату

Из книги Грыжа позвоночника. Безоперационное лечение и профилактика автора Алексей Викторович Садов

Методы диагностики Вероятнее всего, что к врачу вас приведет боль. Боль, которая вымотала вас и с которой непонятно, что делать. Остальное мы будем по привычке терпеть и до последнего откладывать визит к доктору, что, конечно, не может вызвать одобрения и достойно

Из книги Диагностика в тибетской медицине автора Светлана Чойжинимаева

Дополнительные методы диагностики При ощупывании тела пациента врач тибетской медицины выявляет болезненность точек акупунктуры, соответствующих и связанных энергетически с теми или иными внутренними органами. Эти точки располагаются на меридианах, которые являются

Из книги Ишемическая болезнь сердца. Жизнь продолжается автора Елена Сергеевна Киладзе

Инструментальные методы диагностики Выбор диагностических методов, а также последовательность процедур определяет только лечащий врач. Я познакомлю вас с наиболее распространенными методами диагностики ишемической болезни сердца, расскажу, как их выполняют и как к

Из книги Рак желудка и кишечника: надежда есть автора Лев Кругляк

Лабораторные методы диагностики Организм человека – одна из самых сложных и совершенных систем живой природы, нормальная жизнедеятельность которого требует достаточно жесткого постоянства его внутренней среды. Процессы, происходящие в клетках и тканях организма,

Из книги Аллергия автора Наталья Юрьевна Онойко

НОВЕЙШИЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ Радионуклидные методы весьма перспективны (имеется в виду создание опухолеспецифических меченых антител). В настоящее время для диагностики метастазов применяют сцинтиграфию костей скелета, мозга, легких, для характеристики

Из книги Гипертония автора Дарья Владимировна Нестерова

Клинические методы диагностики К клинической диагностике можно отнести сбор анамнеза, т. е. истории заболевания аллергией. Сбор аллергологического анамнеза является первой возможностью для врача и больного установить между собой хорошее взаимопонимание. Эффективные

Из книги Гипотония автора Анастасия Геннадьевна Красичкова

Современные методы диагностики гипертонии Диагностика гипертонии проводится в лечебном учреждении. Опросив и осмотрев больного, врач измеряет его АД (как правило, измерения проводятся в течение нескольких дней и даже недель подряд), назначает лабораторные анализы и,

Из книги Конспект лекций по туберкулезу автора Елена Сергеевна Мостовая

Методы диагностики гипотонии Современная медицина имеет в своем арсенале несколько методов диагностики артериальной гипотензии, позволяющих с уверенностью сделать вывод о наличии и степени тяжести заболевания. Наиболее точный результат достигается при сочетании

Из книги автора

Вопрос 24. Методы диагностики туберкулеза 1. Выявление новых случаев туберкулеза возможно различными способами, в последние годы доля каждого из них заметно меняется. Неоднозначна и точка зрения на то, как лучше выявлять туберкулез. Остановимся на большинстве известных

Из книги автора

Вопрос 25. Методы диагностики туберкулеза Частота выявления «виражных» детей и подростков, так же как и инфицированность населения (процент положительно реагирующих на туберкулин людей среди всех, кому проведена туберкулиновая проба), отражают эпидемиологическую