1979

я 163-х

№ к; их

s тс:-:*

Преаналитический этап

Физические свойства

Реакция мочи (кислотность, рН).

Значение определения рН

Относительная плотность мочи (удельный вес).

ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Определение белка

Важно!

Унифицированный метод Брандберга - Робертса-Стольникова (1972).

Количественное определение

Колориметрические методы

Определение белка в моче с помощью пирогаллолового красного

Нормальные величины

Проведение реакции

Процедура 1 (определение протеинурии)

Процедура 2 (определение микропротеинурии)

Протеинурия

Определение глюкозы в моче

Определение кетоновых тел

Реакция Ланге (1979).

Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы

определение желчных пигментов

Определение уробилиновых тел

Экспресс-диагностика

Принцип работы

Оценка результатов

МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ.

ОРГАНИЗОВАННЫЙ ОСАДОК

Организованные осадки

Количественные пробы

ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ КАМЕРЫ ГОРЯЕВА

Устройство и работа камеры

Сетка Горяева

Метод стандартизации – это совокупность средств достижения целей стандартизации.

Рассмотрим основные методы стандартизации.

1. Упорядочение объектов стандартизации является универсальным методом стандартизации товаров, работ и услуг. Данный метод систематизирует разнообразие продукции. Результатом применения этого метода являются перечни изделий, описания типовых конструкций, образцы форм различной документации. Упорядочение включает в себя систематизацию, симплификацию, селекцию, типизацию и оптимизацию.

Систематизация объектов стандартизации представляет собой последовательное, научно обоснованное классифицирование и ранжирование конкретных объектов стандартизации. Примерами систематизации являются различные виды общероссийских классификаторов.

Селекция объектов стандартизации – это отбор целесообразных для дальнейшего производства и применения объектов стандартизации.

Симплификация – деятельность, выявляющая объекты стандартизации, которые нецелесообразно применять для производства. Симплификация ограничивает перечень применяемых в производстве изделий до оптимального, удовлетворяющего потребности количества.

Типизация объектов стандартизации – это разработка и утверждение типовых объектов или образцов. Типизируют конструкции, технологические нормы и правила документации. Типизация проводится с целью выделения общего признака для совокупности однородных объектов.

Оптимизация объектов стандартизации – деятельность, определяющая оптимальные главные параметры и значения остальных показателей, необходимых для данного уровня качества. В результате оптимизации должна достигаться оптимальная степень упорядочения и эффективности по выбранному критерию.

2. Параметрическая стандартизация – стандартизация, направленная на фиксирование оптимальных численных значений параметров, определяющихся строгой математическойзакономерностью . Под параметром продукции подразумевается количественная характеристика свойств продукции.

Наиболее важными параметрами являются характеристики, определяющие назначение продукции и условия ее использования:

1) размерные параметры (размер одежды и обуви, вместимость посуды);

2) весовые параметры (масса отдельных видов спортинвентаря);

3) параметры, характеризующие производительность машини приборов (производительность вентиляторов и полотеров, скорость движения транспортных средств);

4) энергетические параметры (мощность двигателя и пр.).

Продукция определенного назначения, принципа действия и конструкции, т.е. продукция определенного типа, характеризуется рядом параметров. Набор установленных значений параметров называется параметрическим рядом. Разновидностью параметрического ряда является размерный ряд.

Например, для тканейразмерный ряд состоит из отдельных значений ширины тканей, для посуды - отдельных значений вместимости. Каждый размеризделия(или материала) одного типа называется типоразмером. Например, сейчас установлено 105 типоразмеров мужской одежды и 120 типоразмеров женской одежды.

При стандартизации параметрического ряда необходимо учитывать интересы как потребителей, так и производителей. Если установить, например, слишком большую частоту ряда, потребители будут полностью удовлетворены, а производители будут страдать от очень больших затрат на производство.

3. Унификация продукции – рациональное сокращение до оптимального уровня числа типов объектов одного функционального назначения. Унификация включает в себя: классификацию и ранжирование, селекцию и симплификацию, типизацию и оптимизацию объектов стандартизации.

Унификация осуществляется по следующим направлениям:

1) определение параметрических и размерных рядов для продукции, машин, деталей и приборов;

2) создание типов (образцов) изделий для последующей унификации совокупностей однородной продукции;

3) унификация технологических процессов;

4) сведение к оптимальному минимуму номенклатуры используемых изделий и материалов.

По области проведения унификация делится на межотраслевую, отраслевую и заводскую. По принципам осуществления – на внутривидовую и межвидовую. Показателем уровня унификации является уровень унификации продукции. Он отражает содержание в продукции унифицированных составляющих.

Одним из показателей унификации является коэффициент применяемости:

где n 0 – количество оригинальных деталей (разработанных впервые), шт, n – общее число деталей, шт

Данный коэффициент может применяться к одному изделию или к совокупности изделий, а также для унифицированного ряда.

Результаты работ по унификации оформляются по-разному: это могут быть альбомы типовых (унифицированных) конструкций деталей, узлов, сборочных единиц; стандарты типов, параметров и размеров, конструкций, марок и др.

Примером использования унификации в типоразмерном ряду изделий может быть ГОСТ 26678 на параметрический ряд холодильников. В стандартном параметрическом ряду находятся 17 моделей холодильников и три модели морозильников, коэффициент применяемости ряда составляет 85%. В ГОСТе указываются перечень составных частей, подлежащих унификации в пределах параметрического ряда (допустим, холодильные агрегатыдвухкамерных холодильников с объемом камеры 270 и 300 см3 и объемом низкотемпературного отделения 80 см3), и перечень составных частей, подлежащих унификации в пределах одного типоразмера (например, холодильный агрегат по присоединительным размерам, конденсатор).

4. Агрегатирование. Это метод создания машин, приборов и оборудования из отдельных стандартных унифицированных узлов, многократно используемых при создании различных изделий на основе геометрической и функциональной взаимозаменяемости.

Например, применение в мебельном производстве щитов 15 размеров и стандартных ящиков трех размеров позволяет получить при различной комбинации этих элементов 52 вида мебели.

Агрегатирование очень широко применяется в машиностроении, радиоэлектронике. Развитие машиностроения характеризуется усложнением и частой сменяемостью конструкции машин. Для проектирования и изготовления большого количества разнообразных машин потребовалось в первую очередь расчленить конструкцию машины на независимые сборочные единицы (агрегаты) так, чтобы каждая из них выполняла в машине определенную функцию, что позволило специализировать изготовление агрегатов как самостоятельных изделий, работу которых можно проверить независимо от всей машины.

Расчленение изделий на конструктивно законченные агрегаты явилось первой предпосылкой развития метода агрегатирования. В дальнейшем анализ конструкций машин показал, что многие агрегаты, узлы и детали, различные по устройству, выполняют в разнообразных машинах одинаковые функции. Обобщение частных конструктивных решений путем разработки унифицированных агрегатов, узлов и деталей значительно расширило возможности данного метода.

В настоящее время на повестке дня переход к производству техники на базе крупных агрегатов (модулей). Модульный принцип широко распространен в радиоэлектронике и приборостроении; это основной метод создания гибких производственных систем и робототехнических комплексов.

5. Комплексная стандартизация . При данном методе стандартизации целенаправленно и планомерно утверждается и используется комплекс взаимосвязанных требований к объекту стандартизации и его составляющим для получения оптимального решения проблемы. Если объектом комплексной стандартизации является продукция, то требования утверждаются и применяются к ее качеству, качеству используемого сырья и материалов, эксплуатации и хранению.

Комплексная стандартизация обеспечивает взаимосвязь и взаимозависимость смежных отраслей по совместному производству готового продукта, отвечающего требованиям государственных стандартов.

Например, нормы, требования, указываемые в стандарте на автомобиль, затрагивают металлургию, подшипниковую, химическую, электротехническую и другие отрасли промышленности. Качествосовременного автомобиля определяется качеством более 2000 изделий и материалов - металлов,пластмасс, резинотехнических и электротехнических изделий, лаков, красок, масел, топлива, смазок, изделий легкой, целлюлозно-бумажной промышленности и др. В таких случаях отдельные стандарты, даже когда в них заложены перспективные показатели, не всегда могут обеспечить нужные результаты.

Комплексная стандартизация позволяет устанавливать наиболее рациональные в техническом отношении параметрические ряды и сортамент промышленной продукции, устранять ее излишнее многообразие, неоправданную разнотипность, создавать техническую базу для организации массового и поточного производства на специализированных предприятиях с применением более совершенной технологии, ускорять внедрение новейшей техники и обеспечивать эффективное решение многих вопросов, связанных с повышением качества изделий, их надежности, долговечности, ремонтопригодности, безотказности в условиях эксплуатации (потребления).

Основными критериями выбора объектов КС являются технико-экономическая целесообразность стандартизации и уровень технического совершенства продукции. Принципы комплексной стандартизации основаны на выявлении взаимосвязей между показателями качествасоставных частей изделия и предметов труда. Для нее характерны три главных методических принципа:

1) системность (установление взаимосвязанных требований с целью обеспечения соответствующего уровня качества);

2) оптимальность (определение оптимальной номенклатуры объектов КС, состава и количественных значений показателей их качества);

3) программное планирование (разработка специальных программ КС объектов, их элементов, включаемых в планы государственной, отраслевой и республиканской стандартизации).

Одним из главных показателей, определяющих степень комплексной стандартизации, является интегральный коэффициент охвата изделий стандартизацией Показатель степени комплексной стандартизации – интегральный коэффициент охвата изделий стандартизацией Кинт, получаемый перемножением частных коэффициентов, характеризующих уровень стандартизации сырья, полуфабрикатов, частей и деталей конструкций, комплектующих изделий, оснащения, методов испытаний, готовой продукции и др.:

Кинт = К1 * К2 * К3 * ... * Кn,

где Кп – частные коэффициенты стандартизации каждого элемента конструкции, компонента, входящего в изделие.

Частный коэффициент К представляет собой отношение количества разработанных нормативно-технических документов на стандартизированные элементы конструкции (Кст) к общему количеству нормативно-технических документов, необходимых для выпуска данной продукции (Кобщ), т.е. К = (Кст: Кобщ) х 100.

Частные коэффициенты стандартизации делятся на группы по их отношению к орудиям труда (оборудование, оснастка, инструмент и т. п.), к предметам труда (сырье, материалы, полуфабрикаты и т. п.).

При вынесении окончательного решения учитывается необходимость разработки и реализации программ комплексной стандартизации для нормативно-технического обеспечения ранее запланированных целевых комплексных программ.

В современных условиях инструментом практической организации работ по КС продукции является разработка и реализация программ комплексной стандартизации (ПКС). Они направлены на решение важнейших народнохозяйственных проблем, предусматривают «сквозные» требования на сырье, материалы, полуфабрикаты, детали, узлы, комплектующие изделия, оборудование, инструменты, технические средства контроля и испытаний, метрологическое обеспечение, методы организации и технологической подготовки производства,хранения, транспортировки, регламентирующие условия работы для достижения установленного НТД технического уровня и качества изделий. Многие ПКС представляют собой крупные межотраслевые комплексы.

Ввиду сложности создания и освоения новых высокоэффективных видов сырья, материалов, изделий планы и программы комплексной стандартизации целесообразно разрабатывать на пять и более лет. Разработку конкретных стандартов следует планировать с разбивкой по годам.

Один из наиболее серьезных вопросов в методологии программно-целевого планирования комплексной стандартизации - оценка эффективности ПКС продукции. Она может проводиться на четырех этапах планирования: утверждения перечня ПКС, разработки проекта ПКС, научно-технической экспертизыпроекта, реализации. Достоверность оценки эффективности ПКС имеет большое значение, так как по ней принимается решение о целесообразности ее реализации.

При вынесении окончательного решения учитывается необходимость разработки и реализации ПКС для нормативно-технического обеспечения ранее запланированных целевых комплексных программ.

В отрасли автомобильного и сельскохозяйственного машиностроения осуществляется комплексная программа стандартизации, направленная на максимальную унификацию конструкций деталей и узлов общего назначения. Для целенаправленного выполнения этой работы составлены альбомы рабочих чертежей унифицированных узлов и деталей, разработана нормативно-техническая документация на организацию специализированных производств и освоение унифицированных изделий непосредственно на заводах - изготовителях сельскохозяйственных машин. Установлена обязательность применения унифицированных узлов и деталей при проектировании новых сельскохозяйственных машин, использования их в качестве запасных частей для действующего парка машин.

6. Опережающая стандартизация заключается в установлении повышенных по отношению к уже достигнутому на практике уровню норм и требований к объектам стандартизации, которые согласно прогнозам будут оптимальными в последующее время.

Чтобы стандарты не тормозили технический прогресс, они должны устанавливать перспективные показатели качества с указанием сроков их обеспечения промышленным производством. Опережающие стандарты должны стандартизировать перспективные виды продукции, серийное производство которых еще не начато или находится в начальной стадии.

К опережающей стандартизации можно отнести применение в стандартах отраслей (стандартах организаций) прогрессивных международных стандартов и стандартов отдельных зарубежных стран до их принятия в нашей стране в качестве государственных.

Вид занятия – практическое.

Тип занятия – комбинированное.

Цели занятия:

Образовательные:
– Сформировать общие представления о химической природе и роли ферментов в организме.
– Усвоить огромное значение определения ферментов для дифференциальной диагностики заболеваний.
– Изучить клиническое значение определения ферментов причины изменений при патологических состояниях.
– Уметь оценивать результаты исследований и устанавливать связь с патологией.
– Владеть различными методами определения ферментов.

Развивающая:

познавательной активности

Воспитывающие:

Студент должен:

Локализацию ферментов в органах и тканях.
Клинико-диагностическое значение для дифференциальной диагностики заболеваний.
Унифицированные методы определения ферментов.

Готовить реактивы для определения ферментов.
Записывать рабочие схемы и производить расчет результатов по формуле и калибровочному графику.
Проводить ферментативные исследования.
Работать с аппаратурой.
Выписывать результат анализов на бланк.

Представлять:

Регуляцию в организме путем изменения биосинтеза ферментов.
Кинетику биохимических ферментативных реакции.

Средства обучения.

1. Литература для студентов:

Обязательная:

– Пустовалова Л.М. “Практические работы по биохимии”, Ростов-на-Дону “Феникс” 2004 год.
– Пустовалова Л.М. “Основы биохимии”, Ростов-на-Дону “Феникс” 2004 год.

2. Алгоритмы манипуляций.

II. Учебно-наглядные, технические средства.

Изобразительные:

– Схема “Активность ферментов при инфаркте миокарда”.
– Схема определения кислой фосфатазы, КФК, ά-амилазы.
– Карточки для закрепления.

Дидактический материал:

– Калибровочные графики.
– Калибровочные таблицы на ά-амилазу.
– Карточки-задания.
– Бланки для выписки результатов исследования.

Технические средства обучения:

– Термостат.
– Центрифуга.
– Фотоэлектроколориметры.
– Наборы биохимических реактивов.
– Лабораторная посуда.
– Мультимедийная установка, презентация .

III. Средства контроля:

– Тестовые задания.
– Биохимический диктант.
– Индивидуальный опрос с элементами деловой игры.
– Фронтальный опрос.
– Самостоятельная работа студентов.

Технология проведения практического занятия.

Время проведения 180 минут.

Структурный этап занятия	Цели	Содержание (действие преподавателя)	Планируемый результат (действие студентов)
Организационный момент	Создание рабочей обстановки (2–3 мин.)	Приветствие студентов. Проверка присутствующих и готовность к занятию.	Приветствие преподавателю. Формирование дисциплинарных правил. Психологическая готовность студентов к занятию.
Целеполагание и мотивация учебной деятельности	Акцентирование внимания на значимость темы. Формирование готовности к восприятию (5 мин.).	Сообщение темы, значение занятия. Мотивация значимости данной темы для дальнейшей профессиональной деятельности.	Восприятие информации, включение в учебную деятельность. Проявление заинтересованность к изученному разделу.
Активация и закрепление практических и теоретических знаний	Повторение основных понятий, сформированных на предыдущих занятиях (50 мин.).	Проведение биохимического диктанта (приложение 3 ), фронтальный опрос (приложение 2 ), (приложение 4 ) прием. Индивидуальный опрос с элементами деловой игры. (приложение 5 ). Решение ситуационных задач. (приложение 6 )	Отвечают на контрольные вопросы преподавателя (конкретизация теоретической базы).
Рефлексивно оценочный этап	Выявление уровня знаний студентов и их оценка (2 мин.).	Контроль и оценка изученного раннее материала.	Корректируют свои знания.
Самостоятельная работа студентов	Развитие умения самостоятельной работы. Отработка практических манипуляции (90 мин.).	Разделение студентов на микрогруппы. Выполнение практических манипуляции (приложение 7 ). Закрепление знаний.	Проводят биохимические методы исследования ферментов, производят расчеты, строят калибровочные графики, выписывают результат на бланк и интерпретируют их.
Закрепление материала	Выявление сформированности знаний студентов и их оценка (20 мин.).	Обсуждение и оценка учебной деятельности. Обобщение и оценивание работы студентов.	Корректируют свои знания.
Подведение итогов	Выявить соответствие поставленных и достигнутых целей (5–7 мин.)	Выводы по результативности учебной деятельности и достижения целей урока. Выставление итоговой оценки.	Корректируют свои знания. Участвуют в подведение итогов. Анализируют занятия.
Домашнее задание	Организация подготовки к следующему занятию (2–3 мин.).	Сообщение домашнего задания.	Готовность студентов к восприятию новых тем.

Библиография.

Данилова Л.А .“Справочник по лабораторным методам исследования” Москва “Питер” 2003 г.
Ермолаев М.В., Ильичева Л.П. “Биологическая химия” Москва “Медицина” 1989 г.
Камышников В.С. “ Справочникпо клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностики” Москва “МЕДпресс – информ” 2004 г.
Камышников В.С. “Справочник по клинико – биохимической диагностике” Минск “Беларусь” 2000 г.
Пустовалова А.М. “Основы биохимии” для медицинских колледжей. Издательство Ростов-на-Дону “Феникс” 2003 г.

МИНИСТЕРСТВО ГЕОЛОГИИ СССР

ВСЕСОЮЗНЫЙ НАУЧНО ИССЛ ЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МИНЕРАЛЬНОГО СЫРЬЯ (ВИМС)

Научный совет по аналитическим методам

Химические методы

Инструкция № 163-х

СИЛИКАТНЫЕ ПОРОДЫ

4. При выполнении анализов геологических проб применять методы, рекомендованные ГОСТами и Научным советом по аналитическим методам.

Воспроизводимость и правильность результатов анализа руд и горных пород оценивается согласно Методическим указаниям НСАМ "Методы лабораторного контроля качества аналитических работ".

Примечание: Размножение инструкции на местах во избежание возможных искажений разрешается только фотографическим или электрографическим способом.

ся элементы в условиях комплексонометрического титрования мешают определению кальция и магния, поэтому их предварительно отделяют в виде гидроокисей гидролизом в присутствии уротропина, При этом в растворе устанавливается рй не выше 6, и отделение трехвалентных металлов от кальция, магния и марганца достигается при однократно:.: осаждении. При осаждении гидроокисей в присутствии уротропина следует избегать кипячения раствора, так как после этого осадки плохо отфильтровываются. Окисленные соединения ванадия и хрома восстанавливаются уротропином и осаждаются вместе с гидроокисями трехвалентных металлов, и лишь следы хрома проходят в фильтрат вмеоте с кальцием и магнием. Напротив, никель, содержание которого в магнезиальных породах нередко доходит до 0.5# и более, боль-

шей частью проходит в фильтрат. Медь, свинец и цинк могут присутствовать в силикатных породах в незначительных количествах; при осаждении уротропином эти элементы в основном попадают в осадок гидроокисей 0 .

Двуокись титана. Титан определяют фотометрическим методом по реакции с диантипирилметаном в солянокислом растворе, полученном после растворения осадка гидратов смешанных окислов, или в растворе, полученном после отделения кремневой кислоты. Определение выполняют по инструкции НСАМ Л 56-Х.

Окись железа (общее содержание). Трехвалентное железо определяют комплексонометрическим методом в солянокислом растворе, полученном после растворения осадка гидратов смешанных окислов, или в растворе, полученном после отделения кремне-зой кислоты. Железо титруют ЭДТА в кислом растворе (рН=1.0 -1,5) с с у льфо салицило во й кислотой в качестве индикатора, образующей с железом Ш окрашенное комплексное соединение, менее прочное, чем коьшлексокат железа. Верхний предел величины pH ограничивается присутствием алюминия и титана. При 50-60°С и pH 5»1,5 алюминий и титан могут частично связываться комплексоном Ш. При pH < I железо связывается с комплексоном Ш не полностью. Растворы с большим содержанием титана следует нейтрализовать осторожно, так как гидроокись титана может не раствориться при последующем подкислении раствора до рН=1,5.

Определению железа комплексонометрическим методом не мешают бериллий, бор, кадмий, лантан, медь, молибден, марганец, мышьяк, ниобий, никель, олово, ртуть П. свинец, сурьма, сульфаты, серебро, таллий, уран, хром, цинк. Висмут, цирконий и торий завышают результаты определения. Торий при содержании до 10 мг в титруемом растворе незначительно завышает результат; 10 мг циркония могут быть приняты за 1% Ре 2°з*

В присутствии заметных количеств титана фоо^юр при содержании Р2О5 более I% искажает переход окраски индикатора в точке эквивалентности. В материалах с общим содержанием окиси железа менее 1% железо определяют фотометрическим методом по реакции с оС,dC" -дипирндилом (инструкция НСАМ Л 51-Х) или с сульфосалициловой кислотой (инструкция НСАМ Л 5-00.

Окись алюминия. Окись алюминия.‘ложно определять одни* из двух методов: комплексонометрическим или комплексономет-рнческ!ш-фторидным.

Кокплексонометрический метод применяется для анализа растворов, в которых оттитровано железо*". Метод осковаи иа способности алюминия (и титана) образовывать комплексоиатн (при рН=5-5.5) при введении в раствор точно отмеренного объема раствора ЭДТА и нагревании. Избыток ЭДТА оттжтровы-вают раствором соли цапка. При расчете содержания алюминия пользуются теоретическим титром цинка по алюминию. Метод неприменим к силикатным материалам, содержащим более 32 ТЮ 2 » а также медь, цинк, свинец, цирконий, олово, хром и другие элементы, осаждающиеся вместе со смешанными окислами к образующие прочные комплексонаты.

Комплексоно?детрический-фторидный метод основан на способности комплексояата алюминия разрушаться фторидом: освободившийся ЭДТА титруют раствором соли цинка. Поэтому алюминий и многие другие металлы переводят при рН=5-5,5 в комплексы с ЭДТА, избыток которого оттитровывают раствором соли цинка. Затем в раствор добавляют фторид натрия. Комплехссна? алюминия при этом разрушается, так как образуются более устойчивые фторждные комплексы алюминия. Освободившийся ЭДТА оттитровы-вают раствором соли цинкас кснлечолсшм оранжевым в качестве индикатора. Определение алюминия может быть выло".иге но как в растворе, полученном после отделения кремневой кислоты. так ж в растворах, полученных после растворения гидроокисей в соляной кислоте, в которых оттитровано железо.

При определении алюминия комплексоЕОметржчесюол-фторжд-ныы методом при расчете содержания пользуются эмпирическим титром раствора цинка, установленным при анализе стандартного образца с содержанием алюминия, близким к определяемому. При отсутствии стандартных образцов с различным содержанием а люминмя можно пользоваться поправочными коэффициентами к теоретическому титру раствора цинка. Величина этих коэффициентов определена экспериментально (табл.2). Необходимость установления титра по стандартному образцу или введения по-

Метод применяется только в первом варианте.

Я 163-Х Таблица 2

Поправочные коэффициенты (И) к теоретическому титру цинка по AI2O3

иравочного коэффициента объясняется тем. что реакция образования мало диссоциированного фторида алюминия [л1Т]~ + п?^= =“^ n+ ^^+ У 4 ** не идет до конца.Хотя разлитие в величинах констант нестойкости комплексоната алюминия (рК=16.1) и фторида (р&=19,84) достаточно для практически полного образования фторида алюминия, эта реахцкя, тем не менее, осложняется гидролизом ионов алюминия, в результате которого освобождается не весь ЭДТА, связанный с алюминием, а 97-99^ его.

Так как степень гидролиза зависит от концентрации, количество перешедшего в раствор ЭДТА зависит от содержания алюлшния в растворе и увеличивается с его увеличением. Таким образом, с увеличением содержания алюминия уменьшается величина поправочного коэффициента.

Определению алюминия комплексонометрическим-фторидным методом не мешают бор, висмут, железо, магний, кальций, кадмий. кобальт, лантан, медь., никель, свинец, сурьма, серебро, сульфаты, таллий, уран, фосфоп. цинк 6,0 .

Процесс титрования осложняют элементы, образующие при рН= 5.5 мало устойчивые комплексонятн- марганец П, молибден УТ. вольфрам У1, ниобий У. ртуть П. Однако алшиннй можно определить в растворе, если содержание этих элементов не превышает: Мл П-2 мг, Мо-5 мг, w -5 мг, Nt -1 мг, Hg Д-Ю мг.

Бериллий реагирует с ксиленоловым оранжевым, образуя соединение розового цвета, отливающегося от цвета комплексов ната цинка. Алюминий может быть определен при содержании бериллия в растворе не более 15 мг.

Титан, цирконий, торий и олово, образующие комплексона-ты, разрушаемые фторидами, завышают результаты определения алюминия.

На содержание титана после его определения фотометрическим методом с диантишфилметаном вносится поправка. Однако при содержании ТЮ 2 больше K# результаты определения и с учетом поправки получаются заниженные. Торий и олово реагируют с ЭДТА в условиях определения алюминия не стехио-метрически (по-видимому, вследствие значительного гидролиза). Олово при его содержании в растворе до I мг и торий-до 5 мг не влияют на определение алюминия.

Хром Ш при нагревании образует с ЭДТА комплексонат фиолетового цвета и мешает определению при содержании его в растворе более 0,3 мг^.

Окись дадьпия. Кальций определяют комплексонометржче-схим методом в аликвотной части фильтрата после отделения осадка гидроокисей трехвалентных металлов и титана уротропином (по первому варианту) или после отделения кремневой кус-лоты (по второму варианту).

В качестве металлжндикатора применяют флуорекоон (в виде сухой смеси с хлористым калием). Можно также использовать метилтимоловый синий или тимолфталексон в смеси с метилро-том. Величина pH при титровании коуплексоном должна быть 13-13.5. Соли магния и марганца П в такой среде гидролизуются с образованием малорастворимых гидроокисей, которые при пошшекном содержании магния и марганца выделяются в осадок. Это Ее мешает титрованию кальция комплекс оном Ш, однако боль-пне осадки гидроокисей захватывают некоторое количество кальция, что отражается на правильности его определения. Метод неприменим для определения кальция в породах, содержащих более 30£ окиси магния.

По второму варианту кальций определяют в растворе после отделения кремневой кислоты. Алюминий, железо х титан в этом

случае локируются триэтаноламином. Марганец П в щелочной среде быстро окисляется кислородом воздуха и в виде ионов Мл Ш также переходит в комплексное соединение с триэтаноламином. Однако соединение марганца Ш с триэтаноламином окрашено в зеленый цвет, а поэтому титрование растворов, содержащих более 1,0 мг закиси марганца (~I% Мао в исследуемом материале), затруднительно. Медь также маскируется триэтаноламином.

Окись магния, В аликвотной части фильтрата после отделения осадка гидроокисей магний определяют вместе с кальцием (барием и стронцием) и марганцем титрованием с метадлоин-дикатором хромоген черным ЕТ-00 при рН= 9,5. Чтобы предупредить окисление марганца П до марганца ГУ в щелочной среде кислородом воздуха, в раствор предварительно прибавляют солянокислый гидроксиламнн (или аскорбиновую кислоту) и затем все прочие реактивы непосредственно перед титрованием каждого раствора. Цннн. кадмий и свинец титруются в условиях определения магния. Ионы никеля, меди и кобальта блокируют индикатор и мешают титрованию. Небольшое количество этих элементов (в сумме не более 0.5 мг в титруемом растворе.) можно замаскировать добавлением раствора сернистого натрия. При более высоком содержании их осаждают диэтилдитиокарбаматом натрия*. Содержание магния рассчитывают по разнести между результатом определения сумма кальция, магния я марганца и суммой })езультятоь ксмплексснометричесчо.го определения кальция (бария и стронция) л фотоколориметрического определения марганца. При введении в раствор диэтиддитиокарсалгата натрия марганец отделяется высоте с цинком, кадмием и другими элементами.

По второму варианту окись магния определяю". 1 в растворе (после отделения кремневой кислоты) в присутствии алюминм*. железа, читана и маргзнца ГС. маскирующихся триэтаноламином. Магний в этом случае определяется вместе с кальцием (барием и стронцием).

В качестве металлжнцикатора применяют метилтимоловый синий. Можно также гфименять смешанный индикатор (крезолфта-лекоон нр. фоне тропеолина 0",.

Определению магния не мешают бор, висмут. молибден оло-

во И, сурьма Di в сурьма У, сульфаты. серебоо. таллий. тооий

МИНИСТЕРСТВО ГЕОЛОГИИ СССР Научный Со bit по аналитическим методам при ВИМСе

Химические методы Инструкция N° 163-Х

УНИФИЦИРОВАННЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА СИЛИКАТНЫХ ГОРНЫХ ПОРОД С ПРИМЕНЕНИЕМ КОМПЛЕКСОНОМЕТРИИ

Ип"сииыпым научно-исследовательский институт минерального сырья

Москва, 1979

В соответствии с приказом Мжнгео СССР Л 496 от 29 октября 1976 г. инструкция Л 163-Х рассмотрена и рекомендована Научным советом по аналитическим методам для анализа рядовых проб - Ш категория,

(Протокол Л 31 от 1,П,78 г.)

Председатель НСАМ

Г.В,Остроумов

Зам.председателя секции химических методов

Ученый секретарь

Л,Н.Любимова Р.С.Фридман

Инструкция Je 163-Х рассмотрена в соответствии с приказом Миыгео СССР # 496 от 29.x.76 г. Научным советом по аналитическим методам (протокол Л 31 от 1.П.78 г.) и утверждена ЗИМСом с введением в действие с I июня 1979 г.

УНИ‘ШИРОВЛЯНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА СИЛИКАТНЫХ ГОРНЫХ ПОРОД С 1РИМЕНЕНИЕМ ШШЕКСОНОМЕТРИИ

Первая унифицированная инструкция (Л 69-Х), в которой описывались ускоренные методы анализа силикатных горных пород с применением комслексонометрии, была издана в 1968 г.

Комплексояометрический метод нашел широкое применение в лабораториях геологической службы, и упомянутая инструкция вскоре стала библиографической редкостью. За время, истекшее после издания первой инструкции, разработаны и успешно применяются высокопроизводительные методы анализа силикатов на основе атомной абсорбции и фотоколориметрии. £№есте с тем. не утратили своего значения и комплексонометрические методы, так как они позволяют без применения специальной аппаратуры с высокой точностью определять ряд элементов, особенно при их средних и зысоких содержаниях. Это вызвало необходимость переработать и переиздать прежнюю инструкцию.

В отличие от первого издания в инструкции даны более подробные сведения о характере влияния сопутствующих элементов-примесей и включены приемы, позволяющие применять комп-лексонометрический метод для анализа более сложных силикатных пород. Расширен диапазон определяемых содержаний отдельных элементов.

При подготовке настоящей инструкции, составленной В.А. Хализозой на основании методов анализа силикатных пород, разработанных в ШН АН СССР, ВСЕГЕИ, ЦЛ СЗГУ и БИМСе, учтен опыт работы z рекомендации центральных лабораторий Мингео Узб.ССР, Уральского, Южно-Казахстанского, Иркутского и других геологических управлений, а также химической лаборатории ОЭП ЗИМСа.

z; Внесена в НСАМ химико-аналитической лабораторией ВИМСа. С изданием настоящей инструкции должна быть изъята из употреб лезкя инструкция НСАМ я ь9-Х.

ван на способности этилсндиаг."аштст^х"дАнотати натрия

КомплсксонометричискШ! метод ом|>од<»лмт1.. элементов осно

двух-, трех- и четы

комплексом lii) взаимодействовать с

рехвалентными катионами с образованием прочных растворимых внутрккомплексных соединений^ (комнлексонатов), устойчивых при различной величине pH среда"

Это свойство комплексонатоз позволяет при определенных значениях pH и в присутствии соответствующих индикаторов?ит-риметрически количественно определять отделыше элементы или сумму нескольких элементов в присутствии ряда других^. При комплексонометрическом титровании на один грамм-ион двух-, трех- и четырехвалентного металла расходуется одна грамм-молекула ЭДТЛ.

В инструкции описаны два варианта определения окислов некоторых породообразующих элементов силикатных горных пород с применением комплексонометрии.

По первому вариа}ггу. предназначенному для анализа более сложных объектов, алюминий, железо и титан отделяют от кальция, магния и марганца в виде гидроокисей гидролизом в присутствии уротропина*

По второму варианту анализ не требует разделения элементов. При определении кальция z магния мешающее влияние железа, алюминия, титана л небольших количеств марганца устраняется комплексообразованием с триэтаноламином. Второй вариант предназначен для анализа силикатных горных пород простого состава.

В обоих вариантах содержание кремнекислоты определяют весозым методом после коагуляции с нелатиной.

Нижний предел определяемых комплексонометрическям методом содержаний окисей алюминия и железа составляет 1%» окисей кальция и магния - 0,5#* Нелезо и магний при меньших содержаниях можно определять фотометрическими?летодами* железо с с£,о(/ -дипяридилом, магний с титановым желтым. Титан и марганец взаимодействуют с ЭДТА. но их нельзя определять комплексонометрическими методами, так как невозможно создать условия для избирательного комплексообразования этих элементов. Эти элементы также определяются фотометрическими методами: титан с диантипирилметаном, марганец с формальдокслшм.

Кошлексонометрический метод мало избирателен. При анализе силикатных горных пород, содержащих включения минералов свинца, кадмия, цинка, меди, никеля и кобальта, в ходе анализа возникают осложнения: так, например, свинец, кадмий и цинк взаимодействуют с ЭДТА и титруются вместе с магнием; медь, никель, кобальт блокируют индикаторы при определении магния и кальция, и точка эквивалентности становится незаметной. При анализе силикатов, содержащих примеси указанных элементов, вариант метода с предварительным осаждением гидроокисей алюминия, железа и титана имеет преимущества, так как эти элементы частично осаждаются с гидроокисями и при их общем содержании не более 0,5# не мешают определению магния^. При большем содержании эти элементы отделяют диэтилдитиокарба-матом натрия 8 .

Таблица I

Пределы определяемых содержаний окислов в силикатных породах

		Метод определения	Примечание

Fe 2°5(o6m.) 1 " 20		Комплексономет- рический
		Комплексономет- рический
		Фотометрический
		Комплексономет- рический
		Хомплексономет- рический
	0,1 - 3,0 0.01- 0,5	Фотометрический \| Фотометрический	Только в ходе анализа по методу с отделением гидроокисей уротропином

При анализе по второму варианту, и котором железо, алюминий и титан маскируются триэтаноламином, необходимо убг-диться, что содержание меди, свинца, цинка, кобальта и пико-ля в сумме не превышает 0.3$.

При титровании кальция в щелочной среде (pH = I3-T3.!i) в присутствии больших количеств магния выделяющийся осадок гидроокиси магния захватывает некоторое количество кальция: точность его определения при этом снижается. Поэтому метод не пригоден для определения кальция магнезиальных силикатов, содержащих более 30% магния.

Инструкция предназначена для анализа горных пород, в которых содержание определяемых окислов не выходит за пределы, указанные в табл.1.

Расхождения между повторными определениями отдельных элементов укладываются в допустимые расхождения инструкции по в нутрилабораторному контролю 1 .

Точность определения кремнекислоты, железа, алюминия, титана, кальция и магния описываемыми методами позволяет при полном анализе силикатных горных пород получить сумму 99-101£|.

Сущность метода

Метод анализа с гидролитическим отделением смешанных

окислов в присутствии уротропина " позволяет определять из одной навески силикатных горных пород двуокись кремния, окись алюминия, окись железа (общее содержание), двуокись титана. окись кальция, окись магния, закись марганда.

Анализ выполняют по следующей схеме (рис.1):

Пробу разлагают сплавлением с содой, затем соляной кислотой в присутствии желатины выделяют кремневую кислоту и определяют содержание ее весовым методом.

В фильтрате после отделения кремнекислоты выделяют гидролизом в присутствии уротропина гидроокиси трехвалентных металлов и титана, осадок растворяют в соляной кислоте и в полученном растворе определяют железо и алюминий комплексочомет-

^ Внесено в НСАМ химико-аналитической лабораторией ВИМСа в 1967 г. на основании унификации методов, разработанных в ШН АН СССР5 (М.М.Сочеванова) и ЦЛ C3I7 (Е.М. Гельман).

"К" - комплексонометрический метод:

"В" - весовой метод;

"Ф" - фотометрический метод.

рически, титан - фотометрически. Из этого же раствора может быть определен и фосфор любым из известных методов. В фильтрате, содержащем уротропин, после отделения осадка гидроокисей определяют кальций и сумму кальция, магния и марганца комплексонометрически, марганец - фотометрически. Содержание магния определяют по разности.

Метод анализа без отделения смешанных окислов с маскированием алюминия, железа и титана триэтаноламином 3 ^ (см.схему на рис.2) позволяет определять из одной навески двуокись кремния. окись алюминия, окись железа (общее содержание), двуокись титана, окись кальция и окись магния. Алюминий, железо и титан, мешающие комплексонометрическому определению кальция и магния, маскируют в щелочной среде триэтаноламином.

Двуокись кремния. Пробу разлагают сплавлением с содой, сплав растворяют в соляной кислоте и полученный раствор выпаривают досуха. При этом основное количество кремнекислоты обезвоживается и переходит в осадо::, а оставшуюся в растворе в виде золя кремнекислоту коагулируют желатиной. Определение заканчивают весовым методом.

Упаривание солянокислого раствора в присутствии ионов фтора влечет за собой потерю некоторого количества кремневой кислоты. Поэтому применение метода оцэаничено содержанием в исследуемом материале 1% фтора.

При однократном выделении кремневой кислоты даже с применением желатины небольшое количество ее, как правило, остается в фильтрате. Согласно настоящей унифицированной инструкции при анализе рядовых проб кремневую кислоту из фильтрата повторно не выделяют, а к результату весового определен кия двуокиси кремния, выраженному в процентах, прибавляют^

0.3% или (при повышенных требованиях к качеству анализа) определяют оставшуюся в растворе кремнекислоту фотометрическим методом (инструкция НСАМ Н 104-Х).

Отделение гидроокисей трехвалентных металлов и титана. Алюминий, железо и титан, а также другие легко гидр оли з уххци е-

Внесено в НСАМ химико-аналитической лабораторией НМСа на основании униЗюсации методов, разработанных в ВИМСе (В.А.Хализова) и во ВСЕЛИ (И.А.Столярова)

Слайд 2

Исследование мочи имеет большое диагностическое значение не только при заболеваниях почек, но и многих других органов и систем организма.

Комплекс методов общего анализа мочи обычно включает: - макроскопическую оценку с описанием общих физических свойств; - физические измерения (объем, относительная плотность); - химические исследования, которые проводятся с помощью диагностических тест-полосок (качественный и полуколичественный анализ) : определение рН, белка, глюкозы, кетоновых тел, билирубина, уробилиноидов, крови, нитритов, аскорбиновой кислоты; или химическими методами для подтверждения результатов определения белка и глюкозы, полученных тест-полосками. - микроскопическое исследование осадка мочи

Слайд 3

Для исследования обычно собирают среднюю порцию утренней мочи после тщательного туалета половых органов. Мочу необходимо собирать в совершенно чистую, сухую посуду; хранить до исследования можно не более l " / 2 ч в холодном месте. Применение консервирующих веществ нежелательно, но допускается в виде исключения., Лучшие результаты наблюдения при обработке мочи тимолом (кристаллик тимола на 100-150 мл мочи).

Слайд 4

Количество. Количество утренней мочи (обычно 150-250 мл) не дает представления о суточном диурезе. Измерение объема утренней мочи целесообразно для интерпретации ее относительной плотности. Цвет. Нормальная моча окрашена в более или менее насыщенный желтый цвет (от соломенного до янтарно-желтого). Окраска мочи может меняться при приеме лекарственных препаратов (поливитаминов., салицилатов и др.) или употреблении некоторых пищевых продуктов (свеклы). Патологически измененная окраска мочи бывает при гематурии (вид мясных помоев).

Слайд 5

Прозрачность. В нормальной моче все составные части находятся в растворе, поэтому свежевыпущенная моча совершенно прозрачна (прозрачность полная).

Если моча оказывается мутной в момент выделения, то это обусловлено наличием в ней большого количества клеточных образований, солей, бактерий, жира. Определить причину можно следующим образом: если при нагревании 4-5 мл мочи в пробирке она становится прозрачной, то помутнение было вызвано мочекислыми солями (уратами);если степень помутнения после нагревания не изменяется, то к моче прибавляют 10-15 капель уксусной кислоты, полное или даже частичное исчезновение мути после этого говорит о том, что она была вызвана фосфатами. Полная прозрачность мочи может не достигаться потому, что в таких случаях обычно имеется щелочная моча,находящаяся в процессе разложения, которая содержит микробы и клеточные элементы. Помутнение, исчезающее при добавлении НС1,вызвано оксалатом кальция. Муть, обусловленная присутствием жира, исчезает при взбалтывании мочи со смесью эфира и спирта. Если моча остается мутной, несмотря на все эти процедуры, то муть, по всей вероятности, вызвана микробами, что распознается при микроскопическом исследовании

Слайд 6

Унифицированный метод определения рН мочи с индикатором бромтимоловым синим(1979). Кроме этого метода рекомендуются специальные виды индикаторной бумаги, предназначенные для определения рН мочи (диапазон значении рН 5,0-8,0), или комбинированные экспресс-тесты, в которых реализуется метод «сухой» химии. Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. Моча здорового взрослого человека при обычном питании имеет средние значения рН 6,25 ± 0,36 (от 5,0 до7,0). Колебания рН мочи обусловлены составом пищи; мясная диета сдвигает рН в сторону кислой мочи, растительная или молочная пища - в щелочную. Щелочность мочи увеличивается при рвоте, особенно при высокой кислотности желудочного сока, ощелачивающей терапии, хронической инфекции мочевыводящих путей. Кислотность увеличивается при сахарном диабете, почечной недостаточности. Изменение рН мочи соответствует изменениям рН крови; при ацидозах моча имеет кислую реакцию, при алкалозах - щелочную.

Слайд 7

Однако иногда наблюдается расхождение этих показателей. При хронических поражениях канальцевого аппарата почек (туберкулопатиях) в крови отмечается картина гиперхлоремического ацидоза, а реакция мочи щелочная, что связано с нарушением синтеза кислоты и аммиака в связи с поражением канальцев. При гипокалиемическом алкалозе наблюдается ацидурия. Недостаток калия увеличивает секрецию Н+-ионов канальцами. В данной ситуации это физиологический ответ почечных канальцев, направленныйфизиологический ответ почечных канальцев, направленный на поддержание ионного равновесия между клетками и межтканевой жидкостью. Таким образом, определение рН мочи может иметь значение при дифференциальной диагностике алкалоза и ацидоза разной этиологии.

Слайд 8

Относительная плотность мочи является наиболее изменяемым в течение дня показателем в норме. П р и н ц и п. определение плотности мочи (растворенных в ней веществ) по сравнению с плотностью воды при помощи ареометра (урометра) с диапазоном шкалы от 0,001 до 1,050 мг/см3. Также унифицирован метод определения тест полосками «сухой» химии. Важно помнить, что каждые 3 г/л белка повышают относительную плотность мочи на 0.001, а каждые 10 г/л глюкозы увеличивают цифру плотности на 0,004.

Слайд 9

БЕЛОК- методы определения белка в моче можно разделить на качественные, полуколичественные и количественные. Также можно выделить турбидиметрические методы и колориметрические методы. К турбидиметрическим методам относятся: определение белка с сульфосалициловой кислотой (ССК), определение белка с трихлоруксусной кислотой (ТХУ), Турбидиметрические методы основаны на снижении растворимости белков мочи вследствие образования суспензии взвешенных частиц под воздействием преципитирующих агентов.

Слайд 10

О содержании белка в исследуемой пробе судят либо по интенсивности светорассеяния, определяемого числом светорассеивающих частиц (нефелометрический метод анализа), либо по ослаблению светового потока образовавшейся суспензией (турбидиметрический метод анализа). Величина светорассеяния в преципитационных методах обнаружения белка в моче зависит от множества факторов: скорости смешивания реактивов, температуры реакционной смеси, значения pH среды, присутствия посторонних соединений, способов фотометрии. Тщательное соблюдение условий реакции способствует образованию стабильной суспензии с постоянным размером взвешенных частиц и получению относительно воспроизводимых результатов. Некоторые лекарственные препараты влияют на результаты турбидиметрических методов определения белка в моче, приводя к так называемым «ложноположительным», либо «ложноотрицательным» результатам. К ним относятся некоторые антибиотики (бензилпенициллин), рентгеноконтрастирующие йодсодержащие вещества, сульфаниламидные препарат.

Слайд 11

Турбидиметрические методы плохо поддаются стандартизации, часто приводят к получению ошибочных результатов, но, несмотря на это, в настоящее время они широко используются в лабораториях из-за невысокой стоимости и доступности реактивов.

Слайд 12

Наиболее широко в России используется метод определения белка с сульфосалициловой кислотой

Качественные методы определения белка в моче основаны на его коагуляции в объеме мочи или на границе сред (мочи и кислоты); если есть способ измерить интенсивность коагуляции, то проба становится количественной. Качественная Унифицированная проба с сульфосалициловой кислотой (1972). Р е а к т и в: 20% раствор сульфосалициловой кислоты. Ход о п р е д е л е ни я. В2 пробирки наливают по 3 мл профильтрованной мочи. В опытную пробирку прибавляют 6-8 капель реактива. На темном фоне сравнивают контрольную пробирку с опытной. Помутнение в опытной пробирке указывает на наличие белка, пробу считают положительной. П р и м е ч а н и е. Если реакция мочи щелочная, то перед исследованием ее подкисляют2-3 каплями 10 % раствора уксусной кислоты.

Слайд 13

П р и н ц и п.В основу положена кольцевая проба Геллера, заключающаяся в том, что на границе азотной кислоты и мочи при наличии белка происходит коагуляция белка. 30%-ный раствор азотной кислоты (относительная плотность 1,2) или реактив Ларионовой. Приготовление реактива Ларионовой: 20-30 г хлорида натрия растворяют при нагревании в 100 мл дистиллированной воды, дают остыть, фильтруют. К 99 мл фильтрата приливают 1 мл концентрированной азотной кислоты. Ход исследования В пробирку наливают 1-2 мл азотной кислоты (или реактива Ларионовой) и осторожно, по стенке пробирки, наслаивают такое же количество профильтрованной мочи. Появление тонкого белого кольца на границе двух жидкостей между 2 и 3-й минутой указывает на наличие белка в концентрации примерно 0,033 г/л. Если кольцо появляется раньше 2 мин после наслаивания, мочу следует развести водой и провести повторное наслаивание уже разведенной мочи. Степень разведения мочи подбирают в зависимости от вида кольца, т.е. его ширины, компактности и времени появления. При нитевидном кольце, появившемся ранее 2 мин, мочу разводят в 2 раза, при широком - в 4 раза, при компактном - в 8 раз и т.д. Концентрацию белка при этом вычисляют путем умножения 0,033 на степень разведения и выражают в граммах на 1 л (г/л). Иногда белое кольцо получается при наличии солей уратов. В отличие от белкового кольца уратное появляется выше границы сред между двумя жидкостями и растворяется при легком нагревании

Слайд 14

Количественное определение белка в моче по помутнению, образующемуся при добавлении сульфосалициловой кислоты Принцип метода Интенсивность помутнения при коагуляции белка сульфосалициловой кислотой пропорциональна его концентрации. Необходимые реактивы1. 3%-ный раствор сульфосалициловой кислоты.2. 0,9%-ный раствор хлорида натрия.3. Стандартный раствор альбумина - 1%-ный раствор (1 мл раствора, содержащий 10 мг альбумина): 1 г лиофилизированного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9%-ного раствора хлорида натрия в колбе вместимостью 100 мл, а затем доводят до метки тем же раствором. Реактив стабилизируют прибавлением 1 мл 5%-ного раствора азида натрия (NaN3). При хранении в холодильнике реактив годен в течение 2 месяцев. Специальное оборудование фотоэлектроколориметр. Ход исследования В пробирку вносят 1,25 мл профильтрованной мочи, доливают до 5 мл 3%-ным раствором сульфосалициловой кислоты, перемешивают. Через 5 мин измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 590-650 нм (оранжевый или красный светофильтр) против контроля в кювете длиной оптического пути 5 мм. Контролем служит пробирка, в которой к 1,25 мл профильтрованной мочи долили до 5 мл 0,9%-ный раствор хлорида натрия. Расчет ведут по калибровочному графику, для построения которого из стандартного раствора готовят разведения, как указано в таблице. Из каждого полученного раствора берут 1,25 мл и обрабатывают, как опытные пробы. Прямолинейная зависимость при построении калибровочного графика сохраняется до 1 г/л. При более высоких концентрациях пробу следует разводить и учитывать разведение при расчете.

Слайд 15

Наиболее чувствительными и точными являются колориметрические методы определения общего белка мочи, основанные на специфических цветных реакциях белков. К ним относятся: биуретовая реакция, метод Лоури, методы, основанные на способности различных красителей образовывать комплексы с белками: Понсо S (Ponceau S), Кумасси бриллиантовый синий (Coomassie Brilliant Blue) пирогаллоловый красный (Pyrogallol Red).

Слайд 16

Принцип метода При взаимодействии белка с пирогаллоловым красным и молибдатом натрия образуется окрашенный комплекс, интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации белка в пробе. Состав набора Реагент (Р) - раствор пирогаллолового красного в сукцинатном буфере, готовый к использованию. Калибраторы - калибровочные растворы белка с низкой (0,20 г/л, используется для определения микропротеинурии) и высокой (0,50 г/л, используется для определения протеинурии) концентрацией белка, содержащие 70% альбумина и 30% глобулина, готовые к использованию. Хранение набора- при температуре 2-8°С в упаковке предприятия-изготовителя в течение всего срока годности. Стабильность реагента и калибраторов После вскрытия реагент стабилен 6 мес, калибраторы - 3 мес. при хранении их в плотно закрытом виде при температуре 2-8°С в защищенном от света месте.

Слайд 17

моча - до 0,120 г/л (до 0,141 г/сут); спинномозговая жидкость (СМЖ) - 0,150-0,450 г/л.

Слайд 18

Подготовка к анализу мочу центрифугировать 10 мин при 2700-4000 об/мин. Для проведения анализа использовать чистые, хорошо вымытые пробирки. Тестом на пригодность пробирок для анализа является отсутствие изменения цвета реагента. Если реагент синеет без добавления пробы - результаты определения белка будут завышены; поэтому следует сначала раскапать реагент, а затем добавлять мочу. При постановке метода следует использовать новые кюветы, так как они не окрашиваются реагентом и реакционной пробой. Старые пластиковые кюветы (мутные, не прозрачные) не пригодны для измерения. Кюветы, бывшие в работе, перед использованием обработать следующим образом: выдержать 10 мин в моющем растворе (200 мл 5% раствора перекиси водорода или 1 мл моющего средства), после чего ополоснуть водопроводной и дистиллированной водой не менее 10 раз. Набор пригоден для проведения анализа на биохимических полуавтоматических и автоматических анализаторах.

Слайд 19

Проведение анализа Длина волны: 598 (578-620) нм; длина оптического пути: 10 мм; температура: 18-25°С.Реагент и калибратор перед проведением анализа выдержать при комнатной температуре около 30 минут.

Процедура 1 (определение протеинурии) Пробы перемешать, выдержать 10 мин при комнатной температуре (18-25°С). Измерить оптическую плотность опытной (Е) и калибровочной (Ек) проб против контрольной (холостой) пробы. Окраска стабильна в течение 1 ч. Аналитические характеристики (для процедуры 1) Линейность - в диапазоне 0,070 - 2,00 г/л; чувствительность - не более 0,060 г/л; коэффициент вариации - не более 5%.

Слайд 20

Слайд 21

Перемешать, выдержать 10 мин при комнатной температуре (18-25°С). Измерить оптическую плотность опытной (Е) и калибровочной (Ек) проб против контрольной (холостой) пробы. Окраска стабильна в течение 1 ч. Аналитические характеристики (для процедуры 2) Линейность - до 0,40 г/л; чувствительность - не более 0,010 г/л; коэффициент вариации - не более 5%.

Слайд 22

Слайд 23

Расчет Концентрацию белка в пробе (С) в г/л рассчитать по формуле: С =Е/Ек х Ск. где Ск - концентрация белка в калибраторе, г/л. Примечания Если концентрация белка в пробе превышает 2,00 г/л, пробу разбавить физиологическим раствором: мочу в 3 раза, СМЖ в 5-10 раз. Результат умножить на коэффициент разбавления. Для проверки линейности использовать набор калибровочных образцов белка Новосо-БМ-ПГК, в котором белковый состав калибровочных образцов аналогичен белковому составу калибраторов набора.

Слайд 24

Выделение белка с мочой (протеинурия) может быть почечного и внепочечного происхождения. Внепочечная протеинурия наблюдается при воспалительных заболеваниях мочевыводящих путей, при этом в мочу попадает экссудат белкового характера. Количество белка в моче при этом не бывает большим не более 1гр. Почечная протеинурия бывает, в свою очередь, функционального и органического характера. Функциональная почечная протеинурия наблюдается при сильных раздражениях почек физическими, химическими, термическими и другими факторами. Так, небольшое количество белка в моче может обнаруживаться у совершенно здоровых людей при физической нагрузке, длительной ходьбе (маршевая протеинурия), длительном вертикальном положении (ортостатическая протеинурия), охлаждении, стрессах. Органическая почечная протеинурия является результатом органического поражения паренхимы почек и увеличения проницаемости капилляров почечных клубочков. Выявляется она при острых и хронических гломерулонефритах, инфекционно-токсических состояниях. Количество белка в моче при почечных протеинуриях значительно выражено, чаще превышает 3 гр /л. На сегодняшний день принято считать нормальными суточные потери до 150мг/сутки или до 100 мг/л.

Слайд 25

Унифицированными являются проба Гайнеса, использование поляриметра и диагностические экспресс-полоски. Проба Гайнеса (1972). П р и н ц и п метода основан на способности глюкозы восстанавливать в щелочной среде при нагревании гидрат окиси меди (синего цвета)в гидрат закиси меди (желтого цвета) и закись меди (красного цвета)..Р е а к т и в ы. Реактив Гайнеса: 1) 13,3 гкристаллического сульфата меди х. ч. (Сu-SO4 5НаО) растворяют в 400 мл дистиллированной воды; 2) 50 г едкого натра растворяют в 400мл дистиллированной воды; 3) 15 г глицерина (ч. или ч. д. а.) растворяют в 200 мл дистиллированной воды. Смешивают растворы 1 и 2 и тотчас же приливают раствор 3. Реактив стоек.X о д и с с л е д о в а н и я. К 6-8 мл мочи прибавляют 20 капель реактива до появления голубоватой окраски, смешивают и нагревают верхнюю часть пробирки до начала кипения. Нижняя часть пробирки - контроль. При наличии глюкозы в моче появляется желтая окраска в верхней части пробирки. П р и м е ч а н и е. При бактериурии глюкоза мочи быстро разлагается.

Слайд 26

Кетонурия – появление (выявление) в моче кетоновых тел в количестве. Под «кетоновыми телами» понимают совместное обнаружение ацетона, ацетоуксусной кислоты и бетаоксимаслянной кислоты. К унифицированным методикам относятся экспресс-полоски и пробы Ланге, Лестраде, Ротеры. Реакция Ланге (1979). П р и н ц и п Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами (ацетоуксусной кислотой, бетаоксимасляной кислотой и ацетоном) с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.

Слайд 27

П р и н ц и п. Нитропрусснд натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами (ацетоуксусной кислотой, бета-оксимасляной кислотой и ацетоном) с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.Р е а к т и в ы. 1. Натрия нитропруссид, раствор 50 г/л; готовят перед употреблением.2. Уксусная кислота концентрированная. 3. Аммиак водный - 25 % раствор. Ход о п р е д е л е н и я. Исследуют мочу в первые 3 ч после мочеиспускания. В пробирку к 3-5 мл мочи приливают 5-10 капель раствоpa натрия нитропруссида и 0,5 мл уксусной кислоты, смешивают, а затем осторожно по стенке пробирки пипеткой наслаивают 2-3 мл водного раствора аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо.

Слайд 28

П р и м е ч а н и е. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 ч, но сохраняется в холодильнике; Кетоновые тела могут исчезать из мочи и in vivo при бактериурии. Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. В норме с мочой выделяется 20-50 мг кетоновых тел за сутки К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Чаще всего кетонурия наблюдается при диабете, что является критерием правильности подбора пищевого режима: если количество вводимых жиров не соответствует количеству усваиваемых углеводов, то увеличивается выделение кетоновых тел. При уменьшении введения углеводов (лечение без инсулина) при обычном количестве жиров начинает выделяться ацетон; при лечении инсулином уничтожение глюкозурии достигается лучшим усвоением углеводов и не сопровождается кетонурией. Таким образом, обнаружение кетоновых тел в моче больных диабетом необходимо для регулирования диеты.

Слайд 29

БИЛИРУБИН – конечный продукт обмена желчных пигментов. Большинство проб для обнаружения билирубина в моче основано на его превращении под действием окислителя в зеленый биливердин или пурпурно-красные билипурпурины, которые, примешиваясь к биливердину, дают синее окрашивание.

Слайд 30

Унифицированная проба Фуше (.1972). Р еа к т и в ы. 1.15 % раствор хлорида бария. 2. Реактив Фуше: 25 г трихлоруксусной кислоты растворяют в 100 мл дистиллированной воды и приливают 10 мл 10 % раствора хлорного железа (FeCU). Ход о п р е д е л е н и я. К 10 мл мочи прибавляют 5 мл 15 % раствора хлорида бария. Смешивают, фильтруют. На вынутый из воронки и расправленный на дне чашки Петри фильтр наносят 2 капли реактива Фуше. Появление на фильтре сине-зеленых пятен говорит о присутствии билирубина. Если реакция мочи щелочная, то необходимо подкислить ее несколькими каплями уксусной кислоты. Унифицированная проба Розина (1972)принцип метода такой же. Обнаружение с помощью диагностических полосок- принцип метода такой же – величина билирубинурии определяется в интервале от 5 до 30 мг/л.

Слайд 31

Унифицированные методы – метод Нейбауэра, проба Шлезингера и диагностические полоски. С помощью диагностических полосок возможно определение уробилинов в интервале от 10 до 120мг/л. В свежевыпущенной моче содержатся только уробилиногены, которые при стоянии, окисляясь, переходят в уробилины и имеют одинаковое диагностическое значение.

Слайд 32

Унифицированные методы на сегодняшний день включают не только рутинные вышеперечисленные методики но и широкое использование тест-полосок или приборов для считывания результатов с тест-полосок. Приборы для считывания интенсивности цвета тест-полосок представляют собой отражательные фотометры или рефлектометры, которые представляют собой фотометрические устройства для количественного измерения потоков света, отраженного поверхностью реакционной зоны. Лучи света, отраженные и рассеянные в разных направлениях, многократно отражаются от внутренней стенки сферы прибора, внутри которого создается равномерная освещенность, интенсивность которой определяется суммой всего отраженного исследуемой поверхностью света. Поскольку окраска различных реакционных зон неодинакова, может потребоваться измерение на разных длинах волн, что предусмотрено устройством прибора. При использовании отражательных фотометров необходимо строго следовать инструкции по применению прибора.

Слайд 33

В основе методов, используемых в тест-полосках для анализа мочи, лежат цветные реакции, приводящие к изменению окраски тестовой зоны полоски. В зависимости от химических свойств определяемого аналита используются разные химические методы, в том числе ферментативные (например, глюкозооксидазный метод для анализа глюкозы в моче, или оценка количества лейкоцитов в моче на основе исследования активности их собственной эстеразы). Диагностически значимые изменения показателей мочи должны вызывать визуально заметные изменения окраски. Концентрация реактивов в тестовых зонах должна быть подобрана таким образом, чтобы быстро получить результат (в пределах нескольких десятков секунд).

Слайд 34

В зависимости от типа полоски оценка результатов исследования мочи может быть произведена и зарегистрирована: - визуально, путем субъективного сравнения оператором с прилагаемой к изделию цветной шкалой; - оптическим способом. При использовании для исследования тест-полосок необходимо строго следовать инструкциям фирмы производителя. Изучить этикетку на пенале и коробке, убедиться, что срок годности полосок не истек. Для работы берется образец свежей, нецентрифугированной мочи. Перед исследованием мочу в контейнере необходимо тщательно перемешать. Далее: Достать из пенала одну тест-полоску. Сразу закрыть пенал крышкой. Проверить тест-полоску. Зоны обесцвеченные должны отсутствовать. На 1 секунду погрузите тест-полоску в мочу до последней тестовой зоны. Удалите избыток мочи с помощью фильтровальной бумаги, аккуратно касаясь ребром полоски фильтровальной бумаги. Оцените результат на тестовой полоске через 60 секунд при хорошем освещении. Для оценки количества лейкоцитов – часто время увеличивается до 1,5 -2-х минут. При использовании анализатора следуйте инструкциям прибора.

Слайд 35

в центрифужную пробирку помещают 10 мл из утренней порции мочи после тщательного ее перемешивания. Центрифугируют 5 мин при 2000 об/мин. Затем быстрым наклоном пробирки сливают прозрачный верхний слой, а оставшийся осадок переносят пипеткой с тонко оттянутым концом на середину предметного стекла и накрывают покровным.

Слайд 36

Сегодня существуют одноразовые пластиковые планшеты для микроскопии мочи.

Это изделия разового использования, совпадающие по размеру с предметным стеклом (80 х 30 х 1,7 мм), имеющие 10 камер, каждая из которых имеет покрытие из тонкой пластиковой пластинки, соответствующее покровному стеклу (размером 19 х 17 мм). 10 камер позволяют проводить микроскопическое исследование 10 образцов мочи (нативного или суправитально окрашенного осадка). Устройство позволяет также проводить подсчет форменных элементов без применения счетной камеры.

Слайд 37

Эритроциты имеют дискообразную форму, окрашены в характерный желто-зеленый цвет. Включения:в цитоплазме отсутствуют. В концентрированной моче кислой реакции эритроциты могут приобретать звездчатую форму. При длительном пребывании эритроцитов в моче низкой относительной плотности они теряют гемоглобин и имеют вид одноконтурных или двухконтурных колец. Деление эритроцитов на измененные и неизмененные не имеет первостепенного значения для решения вопроса об источнике гематурии. Дифференцировать эритроциты надо от клеток дрожжеподобных грибов и кристаллов оксалатов кальция округлой формы. Грибы в отличие от эритроцитов чаще овальной формы, более резко преломляют свет, имеют голубоватый оттенок и часто почкуются. Оксалаты обычно имеют различную величину и резко преломляют свет. Прибавление к препарату осадка капли 5 % уксусной кислоты приводит к гемолизу эритроцитов, оставляя грибы и оксалаты без изменения. Н о р м а л ь н а я в е л и ч и н а. В норме эритроциты либо не встречаются, либо обнаруживаются единичные в препарате. К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. гематурия может быть микро – и макро-. Микрогематурия – это обнаружение большого количества эритроцитов, но без изменения окраски мочи. Макрогематурия – это увеличение количества эритроцитов с изменением цвета мочи. Гематурия может быть при поражении паренхимы" почки (гломерулонефрит, пиелонефрит, опухоли и др:),при тяжелой физической нагрузке и при поражениях мочевыводящих путей (почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, уретры).

Слайд 38

Лейкоциты в моче имеют вид небольших зернистых клеток округлой формы размером больше эритроцитов. При низкой относительной плотности мочи размер их увеличивается и в некоторых из них (≪активных≫) можно наблюдать броуновское движение гранул. При бактериуриях в щелочной моче лейкоциты довольно быстро разрушаются. Лейкоциты в моче главным образом представлены нейтрофилами, но иногда можно обнаружить лимфоциты и эозинофилы, которые отличаются обильной, равномерной, крупной, преломляющей свет зернистостью. В норме в мочевом осадке у мужчин от 0 до 3 лейкоцитов в поле зрения, у женщин - до 5 лейкоцитов в поле зрения. К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Увеличение числа лейкоцитов в мочевом осадке свидетельствует о воспалительных процессах в почках или мочевыводящих путях. Наличие в моче ≪активных≫ лейкоцитов свидетельствует об интенсивности воспалительного процесса независимо oт его локализации.

Слайд 39

Эпителиальные клетки. Эпителиальные клетки в мочевом осадке имеют различное происхождение, т. е. десквамация их происходит с органов, покрытых различными видами эпителия(многослойного плоского, переходного и кубического призматического). Клетки плоского эпителия полигональной или округлой формы, больших размеров, бесцветные, с небольшим ядром, располагаются в виде отдельных экземпляров или пластами. Клетки переходного эпителия различной формы (полигональные, «хвостатые≫, цилиндрические, округлые) и величины, имеют желтоватую окраску, интенсивность которой зависит от концентрации мочи и наличия пигментов, содержат довольно крупное ядро. Среди клеток можно встретить двухядерные. Иногда в клетках наблюдают дегенеративные изменения в виде грубой зернистости и вакуолизации цитоплазмы.

Слайд 40

Клетки почечного эпителия неправильной круглой формы, угловатые или четырехугольные, небольших размеров (в 1 ½-2 раза больше лейкоцита). По цвету, эти клетки чаще более прокрашены, чем клетки плоского эпителия - слегка или насыщенно желтоватого цвета. В цитоплазме клеток обычно выражены дегенеративные изменения: зернистость, вакуолизация, жировая инфильтрация. В результате этих изменений ядра часто не выявляются. Клетки почечного эпителия относятся к кубическому и призматическому эпителию, выстилающему почечные канальцы. Чаще они располагаются в виде групп, цепочек. В некоторых случаях встречаются в виде комплексов округлой или фестончатой формы, состоящих из большого количества клеток разной величины с явлениями жирового перерождения. Часто располагаются на цилиндрах, таким образом, подтверждая их происхождение., расстройствах кровообращения. Обнаружение клеток почечного эпителия в тесной связи с цилиндрами говорит о тяжелом поражении почек. Эпителиальныеклетки

Слайд 41

К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Особого диагностического значения клетки плоского эпителия, попадающие в мочу из влагалища, наружных половых органов и мочеиспускательного канала, не имеют, но если их обнаруживают расположенными пластами в моче, взятой катетером, то это может указывать на метаплазию слизистой оболочки мочевого пузыря. Такую картину можно наблюдать при лейкоплакии мочевого пузыря и мочеточников, что рассматривают как предопухолевое состояние. Указание на обилие клеток плоского эпителия может служить признаком ошибки преаналитического этапа и говорить о затруднении микроскопии осадка. Переходный эпителий выстилает слизистую оболочку мочевого пузыря, мочеточников, почечных лоханок, крупных протоков предстательной железы и простатического отдела мочеиспускательного канала. Усиленное слущивание клеток этого эпителия может быть при острых воспалительных процессах мочевого пузыря и лоханок, интоксикациях, а также при мочекаменной болезни и новообразованиях мочевыводящих путей. Клетки почечного эпителия можно выявить в мочевом осадке при поражении паренхимы почек (нефритах), интоксикациях, расстройствах кровообращения. В мочевом осадке практически всегда встречают клетки плоского и переходного эпителия от единичных в препарате до единичных в поле зрения. Единичные в препарате клетки почечного эпителия на фоне нормальной микроскопической картины мочевого осадка не дают основания говорить о патологии

Слайд 42

Организованные осадки Цилиндры - элементы осадка. Представляют собой белковые слепки с канальцев, имеющие цилиндрическую форму и различную величину.

Принято выделять следующие виды цилиндров: гиалиновые, зернистые, восковидные, эпителиальные, эрнтроцитарные, пигментные, лейкоцитарные. Гиалиновые цилиндры имеют нежные контуры, прозрачны, при ярком освещении плохо заметны. На поверхности может быть легкая зернистость за счет аморфных солей или клеточного детрита. Образуются из коагулированного белка. Появление гиалиновых цилиндров свидетельствует о развитии протеинурин, что является следствием повышенной проницаемости клубочковых капилляров. Они представляют собой коллоидную форму белка, возникающую при изменении рН. Важно помнить, что наличие гиалиновых цилиндов возможно без обнаружения белка в моче – в данном случае коагулированный белок и есть цилиндры. Зернистые цилиндры имеют более четкие контуры и состоят из плотной зернистой массы желтоватого цвета. Восковидные цилиндры имеют самые из всех цилиндров резко очерченные контуры и гомогенную, блестящую,желтоватую структуру. Образуются из уплотненных гиалиновых и зернистых цилиндров при застое их в канальцах. Эпителиальные цилиндры имеют четкие контуры и состоят из клеток почечного эпителия. Эритроцитарные цилиндры желтоватого цвета состоят из массы эритроцитов, образуются при почечной гематурии. Пигментные цилиндры могут быть обнаружены при гемоглобинурии и миоглобинурии; коричневого цвета, имеют сходство с зернистыми. .Лейкоцитарные цилиндры. образуются из массы лейкоцитов, обнаруживаются при гнойных процессах в почках, пиелонефритах.

Слайд 43

Кроме цилиндров, образованных из белка и клеток, в мочевом осадке иногда встречаются образования цилиндрической формы из аморфных солей, не имеющие практического значения. Эти образования растворяются при подогревании препарата или прибавлении к препарату капли щелочи либо кислоты

Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы. В нормальной моче можно встретить единичные гиалиновые цилиндры (1-2 в препарате).К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е. Цилиндрурия является симптомом поражения паренхимы почки. В осадке мочи можно встретить элементы гриба, трихомонады, яйца остриц, бактерии, посторонние примеси – элементы талька или жирные капли от вазелина или кремов.

Слайд 44

В случае обнаружения отклонений при ориентировочной микроскопии необходимо проводить количественные микроскопические исследования. К ним относятся определение форменных элементов в 1 мл мочи по методу Нечипоренко и определение форменных элементов в суточной моче – метод Аддис –Каковского. Также к количественным методам относится проба Зимницкого.

Слайд 45

Площадь -- 9 мм2 Глубина -- 0,1 мм Объем -- 0,9 мм3 Камера состоит из толстого предметного стекла с нанесенными на него поперечными прорезями, образующими три поперечно расположенные плоские площадки.

Слайд 46

Средняя площадка продольной прорезью разделена на две, каждая из которых имеет выгравированную на ней сетку. По обе стороны средней площадки в камере Горяева расположены две других на 0,1 мм выше средней. Плоскости этих площадок служат для притирания покровного стекла до появления так называемых Ньютоновских колец. После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других остаются щели (капиллярные пространства), через которые и заполняют камеру.

Слайд 47

Слайд 48

в аликвотной части раствора, мг

Израсходовано на титрование 0,05 м раствора цинка, мл

Израсходовано на титро-рование ■0,05 М раствора цинка мл

Постоянной величиной во всех сетках является так называемый «малый квадрат», сторона которого равна 1/20 мм, следовательно, его площадь равна 1/400 мм2. Сетка Горяева (рис. 1) содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом), разграфленных вертикально, горизонтально, крест на крест и неразграфленных.

Слайд 49

Проба Зимницкого - основана на исследовании относительной плотности мочи в разных порциях в течение суток на обычном пищевом и питьевом режиме.

Сбор мочи осуществляется пациентом каждые 3 часа в отдельные подписанные емкости. Определяют в каждой порции объём, относительную плотность, иногда хлорид натрия и мочевину. О нормальной реакции почек судят если – Дневной диурез превышает ночной; Колебания плотности значительны в отдельных порциях; Разница между наиболее высокой и низкой относительной плотностью не должно быть менее 0,007; Выведено почками должно быть не менее 80%. О патологии свидетельствуют: Монотонность мочевыделения; Превышение ночного диуреза над дневным; Малая амплитуда колебаний плотности; Полиурия.

Слайд 50

Посмотреть все слайды